實驗步驟
一、試劑配制
1. 5×TBE緩沖液：450 mmol/L Tris-硼酸，10 mmol/L EDTA，pH值8.0。使用時將上述儲存液稀釋10倍至0.5×TBE緩沖液，可同時作為電泳及制膠用的緩沖液。
二、制膠
1. 根椐制膠量及凝膠濃度，在加有一定量的電泳緩沖液的三角錐瓶中，加入準確稱量的瓊脂糖粉（總液體量不宜超過錐瓶的50%
容量）。瓊脂糖粉末與0.5×TBE buffer的比例（w：v）參考表1，常用瓊脂糖濃度為0.7-1%。
表1 瓊脂糖凝膠濃度與線形DNA的最佳分辨范圍
| 瓊脂糖濃度 | 最佳線形DNA分辨范圍（bp） |
| 0.50% | 1 000～30 000 |
| 0.7% | 800～12 000 |
| 1% | 500～10 000 |
| 1.20% | 400～7 000 |
| 1.50% | 200～3 000 |
| 2% | 50～2 000 |
| 2%～5% | 20～1 000 |
2. 在錐瓶的瓶口上蓋上保鮮膜或牛皮紙，并在膜或紙上扎些小孔，然后在微波爐中加熱溶解瓊脂糖。加熱時，當溶液沸騰后，請戴上防熱手套，小心搖動錐瓶，使瓊脂糖充分均勻溶解。此操作重復數次，直至瓊脂糖完全溶解。
3. 使溶液冷卻至50℃-60℃左右，如需要可在此時加入溴化乙錠溶液（終濃度0.5 μg/ml）或按照1 μL / 30 mL的比例加入DNAgreen染料，并充分混勻。
4. 將瓊脂糖溶液倒入制膠模中，然后在適當位置處插上梳子。凝膠厚度一般在3~5 mm之間。制膠模如下圖所示，小膠倒入25-30 mL左右瓊脂糖溶液，大膠則60-70 mL左右，若需切膠回收，凝膠可適當加厚。
5. 在室溫下使膠凝固，大約30分鐘~1小時。
三、上樣
1. 取適量樣品與6×上樣緩沖液混勻（如：1 μl樣品與5 μl 6×上樣緩沖液），用微量移液槍小心加入樣品槽中。
2. 上樣量根據樣品濃度可適當調整，若DNA含量偏低，則可依上述比例增加上樣量，但總體積不可超過樣品槽容量（一般小孔40 μl 為上限，大孔200 μl 為上限，具體和制膠膜規格相關）。
3. 每加完一個樣品要更換槍頭，以防止互相污染，注意上樣時要小心操作，避免損壞凝膠或將樣品槽底部凝膠刺穿。
四、電泳
1. 加完樣后，合上電泳槽蓋，立即接通電源。控制電壓保持在110 V，電流在40 mA以上。
2. 當條帶移動到距凝膠前沿約2 cm時（約40 min），停止電泳。
3. 紫外下拍照并觀察。
注意事項
1. 5×TBE緩沖液放置時間過久會沉淀，因此一次性不要配太多。工作用電泳緩沖液為0.5×TBE緩沖液，取5×TBE緩沖液貯存液稀釋，現配現用。
2. 用于電泳的緩沖液和用于制膠的緩沖液必須統一。
3. 瓊脂糖粉在微波爐中加熱時間不宜過長，每次當溶液起泡沸騰時停止加熱，否則會引起溶液過熱暴沸，造成瓊脂糖凝膠濃度不準，也會損壞微波爐。溶解瓊脂糖時，必須保證瓊脂糖充分完全溶解，否則，會造成電泳圖像模糊不清。
4. 凝膠不立即使用時，請用保鮮膜將凝膠包好后在4℃下保存，一般可保存2～5天。