1.用不同方法誘導細胞調亡后,取106調亡細胞,置1.5ml離心管中,用PBS洗滌一次。在微量離心機上全速離心5秒鐘,去上清液。加入 100μl含5mol/L異硫氰酸胍,100mmol/L 2-巰基乙醇的25mmol/L枸櫞酸鈉緩沖液pH7.0,在旋渦混懸器上混懸20秒鐘,破壞細胞,變性蛋白質。
2.加入50μl含7.5mol/L醋酸氨和0.8mg/ml糖原的水溶液,混勻;加入300μl 100%乙醇,4℃保存過夜。
3.在微量離心機上全速離心30分鐘,去上清液。加入75%乙醇同樣離心洗滌沉淀物2次。用20μl含100μg/ml無DNA酶的RNA 酶的TE緩沖液消化RNA,37℃ 30分鐘。加入10μl甘油和少量溴酚藍,直接點樣。
4.用50ml TAE溶解2g瓊脂糖,加入0.25μg/ml溴乙啶。倒板后加樣,用100bp DNA標記物作為標記。25mV電泳過夜。在紫外線下觀察結果。調亡細胞的DNA呈相差200bp的條帶的梯形圖。
一、凝膠的制備和電泳由于氧能抑制丙烯酰胺的聚合反應,灌制聚丙烯酰胺凝膠常在兩塊封閉的玻璃平板所形成的夾層間進行。在這種裝置形式下,僅有頂層的凝膠與空氣中的氧氣相接觸,從而大大減少了氧對聚合的抑制作用。......
一、凝膠的制備和電泳由于氧能抑制丙烯酰胺的聚合反應,灌制聚丙烯酰胺凝膠常在兩塊封閉的玻璃平板所形成的夾層間進行。在這種裝置形式下,僅有頂層的凝膠與空氣中的氧氣相接觸,從而大大減少了氧對聚合的抑制作用。......
聚丙烯酰胺凝膠通過丙烯酰胺單體、鏈聚合催化劑N,N,N’,N’-四甲基乙二胺(TEMED)和過硫酸銨以及交聯劑N,N’-亞甲雙丙烯酰胺之間的化學反應而形成。丙烯酰胺單體在催化劑作用下產生聚合反應形成長......
1、瓊脂糖凝膠電泳—凝膠攝影需配置135照相機,全色135膠卷,照相機固定架,近攝鏡和紅色濾光鏡以及有機玻璃防護面罩。操作需在暗室進行,將相機固定好,把凝膠放在紫外檢測儀上適當位置,調焦,裝上紅色濾光......
(1)瓊脂糖凝膠電泳凝膠的制備和電泳—用透明膠將玻璃板或電泳裝置所配備的塑料盤的邊緣圈封,制成膠模,置水平工作臺上;(2)瓊脂糖凝膠電泳凝膠的制備和電泳—稱取適量瓊脂糖,置電泳緩沖液中,加熱使瓊脂糖溶......
2020年5月20日-22日,由中國化學會色譜專業委員會主辦,分析測試百科網承辦的"第四屆色譜網絡研討會"已經圓滿落幕。本次大型網絡研討會歷時三天,分為色譜技術在生物分析和生命科學......
凝膠電泳的原理比較簡單。當一種分子被放置在電場當中時,它們就會以一定的速度移向適當的電極,這種電泳分子在電場作用下的遷移速度,叫做電泳的遷移率。它同電場的強度和電泳分子本身所攜帶的凈電荷數成正比。也就......
近日,由中國科學院過程工程研究所聯合中國標準化研究院等機構共同制定的我國首批瓊脂糖微球分離介質國家標準(瓊脂糖分離介質:GB/T38170-2019、蛋白A親和層析介質:GB/T38172-2019、......
在蛋白質組學和蛋白質分離研究中,凝膠電泳是廣泛使用的分離技術。它是以凝膠等聚合物作為分離介質,利用其網絡結構并依據被測組分的分子體積不同而進行分離的一種分離模式。在芯片上采用凝膠電泳模式分離蛋白質,更......
帶電物質在電場中向其所帶電荷相反的電極移動的現象稱電泳。電泳分離生物大分子的原理: 由于混合物中各組分所帶電荷性質、電荷數量以及分子量的不同,在同一電場的作用下,它們泳動的方向和速度也不同。......