一、分析方法的選擇：
常見的分析方法有:一點終點分析法,二點終點分析法,速率法,二點速率法。
1、一點終點分析法： 該法使用校正液,其原理是經過一定反應時間后,反應達到平衡時進行的一點分析。例如:雙縮脲法測定總蛋白,溴甲酚綠法測定白蛋白均用該法。對于反應快的物質選用一點終點分析法。
2、二點終點分析法： 該法使用校正液,其原理是用二點的吸光度之差進行計算。多數項目選用該法。應用該法分兩種情況。
2 .1、在單試劑分析中,測定波長同常見干擾物質的吸收光譜有重疊時(如脂血、溶血、黃疸樣品),通過選用二點終點分析法可消除樣品空白引起的干擾。例如:ＧＯＤ-ＰＯＤ法測定血糖,其測定波長為500ｎｍ,溶血樣品中的血紅蛋白在500ｎｍ有較強吸收,其吸光度大小在整個反應過程中保持不變,用反應完成時測定點的吸光度減去剛開始反應第一點的吸光度,這樣就扣除了溶血產生的吸光度,消除了溶血對測定的干擾。
2 .2、在雙試劑分析中,選用二點終點分析法可消除內源性物質的干擾。
3、速率法：用于酶活力的測定。所有酶活力測定均選用速率法。其原理是根據酶所催化反應的速率來測定酶活力的大小。 www.labdd.com
4、二點速率法：主要用于堿性苦味酸法測定肌酐。肌酐同苦味酸反應,其速率不成線性,因而不能用速率法。由于血清中的草酰乙酸能很快同苦味酸反應形成紅色化合物干擾測定,隨著反應時間的延長,血清中的維生素Ｃ、丙酮酸、蛋白質等也能同苦味酸反應形成紅色化合物干擾測定。為了消除干擾,堿性苦味酸法測定肌酐要求在30秒和60秒兩點測定,因而選用二點速率法。
二、雙波長測定中輔助波長的選擇：
雙波長的應用是為了消除樣品中對測定有干擾的物質的影響,而實際應用中選擇輔助波長主要用于消除脂血、溶血、黃疸的干擾。脂血樣品中的脂質吸收光譜從300～600ｎｍ均有吸收,呈逐漸下降的趨勢;溶血樣品中的血紅蛋白在350ｎｍ、400ｎｍ、540ｎｍ、580ｎｍ有4個吸收峰;黃疸樣品中的膽紅素在300～500ｎｍ均有吸收,在400～500ｎｍ之間有強吸收峰。由于脂血、溶血、黃疸樣品在較寬的波長范圍內有較強的吸收光譜存在,因而常常同測定波長有重疊,此時測得的吸光度包含待測物質的吸光度和干擾物質的吸光度,選用輔助波長可消除干擾物質的吸光度。在輔助波長選擇中,根據測定波長選擇輔助波長,要求干擾物質在測定波長同輔助波長有相同的吸光度。例如:鉬酸銨法測定無機磷,其測定波長為340ｎｍ,對于溶血樣品,血紅蛋白在340ｎｍ有較強吸收,其吸光度同380ｎｍ處吸光度相同,選用380ｎｍ作輔助波長,用340ｎｍ和380ｎｍ兩波長的吸光度之差測定無機磷,可消除溶血對測定的干擾。