用于檢測和定量分析極性細胞代謝物的一種新穎...（三）

2. 使用UPLC／Xevo-TQ聯用儀器對HILIC LC-MS方法開發標準品和細胞萃取物進行定量分析

在UPLC優化過程中進行的標準品分析表明使用酸性pH的流動相緩沖液可提高對氨基酸和有機酸的分辨率、信噪比和峰對稱性。圖3比較了對一種包含約2μg/mL L-賴氨酸的純氨基酸溶液所得出的兩幅MRM色譜圖。靠上的色譜圖通過使用堿性流動相（液相色譜條件1）所進行的分離而得出，而靠下的色譜圖則采用酸性流動相（液相色譜條件2）。

圖3. 比較不同pH下，包含約2μg/mL L-賴氨酸溶液的兩幅MRM色譜圖

圖4. 液相色譜條件（2）得出的MRM色譜圖示例

圖4將酸性流動相（液相色譜條件（2））下1600ng/mL校準標準品（上圖）和樣本H-S（0090）的MRM色譜圖進行了疊加。

在此條件下，我們成功分離并定量分析了28種化合物，其中包括氨基酸、有機酸和磷酸鹽（圖6）。

圖5. TargetLynx給出的ADP電子報告示例

43種化合物的定量分析（既包括酸性也包括堿性條件）使用TargetLynx^TM進行。對于每種化合物，均生成了相應的電子報告；計算結果通過線性回歸進行確定。圖5是腺苷二磷酸（ADP，在三羧酸循環中特別重要）的一個報告示例。