Z’ 因子由陰性(無cAMP，無cAMP-d2)和陽性質控(無cAMP)計算得到2。
利用SoftMax? Pro軟件生成和分析數據，包含一些預設的HTRF實驗模板以簡化檢測和分析。
結果
使用SoftMax Pro軟件的4-參數曲線擬合如上所述進行數據分析和做圖。依據表2的讀板機參數設置獲得最佳結果。當延遲時間、整合時間和脈沖數增加，會觀察到DF%的下降。與白色微孔板(圖2)相比，使用黑色低體積384-孔微孔板可使檢測窗從3020增加到3253。然而，Z’ 因子，考慮到陽性和陰性質控的檢測窗和標準差以及EC 50值在兩個孔板類型中非常相似(表3)。(注意：當使用SpectraMax M5e多功能微孔板讀板機，需要白色孔板。)
SpectraMax i3和SpectraMax Paradigm讀板機在逐一比較相同測試孔板時得到的結果基本一致(圖3)。針對這一測試，利用了白色微孔板。檢測窗為3004和3051，且Z’ 因子分別是0.92和0.90。EC50值是19.1nM，相比于發布值(表3)。SpectraMaxM5e多功能微孔板讀板機得到相似的Z’因子和EC50值。
SpectraMax Paradigm讀板機得益于雙PMT配置而比其他讀板機更快，使之可以同時讀取兩個HTRF發射波長(表3)。
總結
SpectraMaxi3和SpectraMaxParadigm讀板機可配置具有高通量篩選能力且HTRF認證的檢測卡盒。當在SpectraMaxParadigm讀板機上使用時，此卡盒能進行雙發射同時檢測從而加快讀數速度。在三個讀板機中，cAMPHiRange測定得到的完美Z’因子表明了多功能檢測系統的可靠性能。采用SoftMaxPro軟件自帶的HTRF預設實驗模板大大簡化了數據采集和分析。
參考
1. http://www.htrf.com/htrf-technology
2. Zhang,
J. H., Chung, T. D. Y., and Oldenburg,K. R. (1999). A simple statistical
parameter for use in evaluation and validation of highthrough put
screening assays J. Biomolecular Screening4(2): 67-73.
