試劑、試劑盒 核心 RNA 聚合酶核心 RNA 聚合酶-σ32 復合物σ32 非變性膠樣品緩沖液儲存緩沖液考馬斯亮藍（CBB) 染色液脫色液
儀器、耗材 非變性凝膠電泳裝置
實驗步驟
材料與設備
核心 RNA 聚合酶
核心 RNA 聚合酶-σ32 復合物，由免疫親和柱洗脫所得
σ32，由 POROS 50S 陽離子交換柱洗脫所得
非變性凝膠電泳裝置
試劑
非變性膠樣品緩沖液（2X)(同 SDS 樣品緩沖液，但不含 SDS。)
儲存緩沖液
考馬斯亮藍（CBB) 染色液
脫色液
(配方，見"試劑的配制"，PP.184~189)
操作程序
1) 制備非變性膠（如，4%?12% 膠），帶 10 個泳道。
注：有幾家制造廠商（如，NOVEX) 出售的供 SDS-PAGE 用的梯度 Tris-甘氨酸小膠 (minigel) 實際上是不含 SDS 的。逋常，電泳過程中 SDS 是從電極液和樣品緩沖液進入凝膠的，只要這些緩沖液中不含 SDS, 這些凝膠就能相當容易地以非變性的方式進行電泳。
2) 取各蛋白質樣品 1~10ul, 加入 5~9ul 的儲存緩沖液中，再加 10~20ul 的 2X 非變性膠樣品緩沖液。混勻。建議按下表列出將各樣品及其合適的蛋白量。
3) 每孔各加 20ul 樣品，跑電泳，CBB 染色后脫色。
注：高效液相色譜 (HPLC) 法中的凝膠排阻色譜法也可用來測定蛋白質大小的不均一性。如本單元方案補充實驗一節所述。