甲胎蛋白（AFP）定量測定（酶聯免疫法）標準操作規程

 1. 原理

本試劑盒采用針對不同抗原決定簇的雙單克隆抗體分別制備成包被板和酶結合物，和用ELISA雙抗體夾心法原理檢測人血清中AFP含量。適用于原發性肝細胞癌及胎兒神經管發育異常（脊柱裂、腦積水）的早期輔助診斷。

2. 標本采集：

2.1 標本采集前病人準備：受檢者應空腹

2.2 標本種類：血清或血漿

2.3 標本要求：

病人標本無需特殊制備處理

3. 標本儲存于運輸

3.1 標本的儲存：待測樣本室溫不超過8小時，4-8℃不超過72小時，-20℃可長期保存，避免反復凍融。

3.2 標本運輸：室溫運輸

3.3 標本拒收標準：細菌污染，嚴重溶血或脂血標本不能作測定。

4. 試劑：

4.1 試劑名稱：甲胎蛋白（AFP）診斷試劑盒

4.2 試劑生產廠家：購買專用成套試劑盒。必須使用經國家食品藥品監督管理局批準的試劑。4.3 包裝規格：100Test/kit

5.試劑盒組成

5.1 標準品（10、20、50、100、200、400）ng/ml,各1瓶×1ml。

5.2 洗滌液：1瓶×8ml(使用前用500ml蒸餾水稀釋)

5.3 包被條 5.4 酶結合勿 5.5 底物 5.6 顯色劑 5.7 終止液 5.8 說明書（1份）

試劑儲存條件及有效期：試劑盒貯存2-8℃條件，有效期12個月。

6.儀器設備

7.操作步驟

7.1 加樣：將包被孔編號，留1孔作空白對照，其余孔用微量加樣器依次加入50ul標準品及待測樣品，隨即加入酶結合物50ul。輕輕振蕩混勻后，置37℃溫育30分鐘。

7.2 洗滌：手工：將各孔液體甩掉，用稀釋后的洗滌液注滿各孔，靜置20秒，甩掉，重復5次后在吸水紙上拍干。

7.3 顯色：每孔加底物50ul,在加顯色劑50ul,充分混勻，室溫（18-25℃）避光反應5分鐘。

7.4 每孔加終止液50ul終止反應。