瘦肉型豬(PIC344)精液堿性磷酸酶的分離純化及部分性質研究

摘　要:用正丁醇抽提、硫酸銨分級沉淀、DEAE2Sepharose FF 和Sephacryl S2200 柱層系,從瘦肉型豬( PIC344) 精液中提取出堿性磷酸酶。純化倍數11146 ,比活為81123U/ mg 蛋白。提取液經PAGE 和SDS2PAGE 檢測,呈現一條帶。該酶相對分子質量為90112 KD ,亞基分子質量為48141 KD ,該酶為兩個相同亞基組成。等電點為8119 ,最適pH 值915 ,最適溫度為40 ℃,以磷酸苯二鈉為底物測得Km 值為3198 ×10 - 4mol/ L 。經分析,Cu2 + 、Cd2 + 為酶的抑制劑,Ni2 + 、Ca2 + 、Mg2 + 為該酶的激活劑。選用CuSO4 、Cd(NO3) 2 作酶的抑制類型判斷,結果表明,CuSO4 為非競爭性抑制,抑制常數為1132 ×10 - 3mol/ L ,Cd(NO3) 2 為競爭性抑制,抑制常數為3133 ×10 - 4mol/L 。