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  • 發布時間:2023-04-06 14:58 原文鏈接: 白屈菜的理化鑒別介紹

      (1) 化學定性 取粗粉末5g,用氨化的氯仿20ml 浸泡過夜,濾過,氯仿液分為2份,一份留作薄層點樣,另一份揮去氯仿,以1%鹽酸2ml溶解,放入試管中,滴加改良碘化鉍鉀試液,溶液立即產生紅棕色沉淀。 (生物堿反應)

      (2) 薄層層析 樣品制備:同“化學定性”項。也可以將“化學定性”項中氯仿浸提過的藥渣,充分揮去溶劑,再以甲醇浸泡過夜,濾過,濾液濃縮至2ml,點樣于硅膠G薄層板(青島產,以0. 5%氫氧化鈉溶液鋪板,于120℃烘烤4小時以上)上。氯仿浸出部分用己烷-氯仿-甲醇(6:3:0.3)或甲醇浸出部分用氯仿 -甲醇(9 : 1)展開,氨蒸氣飽和,展距10cm。氯仿浸出液用白屈菜堿、四氫黃連堿、白屈菜紅堿、血根堿作對照,在紫外光燈 (254~365nm)下觀察,結果,白 屈菜根提取物中4種生物堿均被檢出,而地上部分的提取物中未檢出白屈菜紅堿。甲醇提取物用小檗堿和黃連堿作對照,以改良碘化鉍鉀試劑噴霧,結果,白屈 菜根提取物中2種生物堿均被檢出,而地上部分提取物只檢出黃連堿。

      (3) 紙層析 取粉末0.1g,用1%檸檬酸溶液飽和的丁醇10ml浸泡1小時,并時時搖動,過濾,濾液用圓心紙層析法以水飽和的正丁醇飽和濾紙在1小時后展開30~45分鐘,取出,干后在紫外光燈下觀察,顯黃、黃綠、綠和紅色等4種色帶。

      (4) 含量測定①白屈菜堿的測定:比色法 將樣品先以硫酸的甲醇溶液提取,提取液蒸去甲醇后,酸液用氫氧化鈉溶液中和并呈堿性,以氯仿提取,再酸化提到水相,然后再以氫氧化鈉溶液堿化以氯仿提取,蒸去氯仿,殘渣溶于甲醇并調成一定體積。取一定量此溶液點于預先以丙酮-甲酰胺(7:3)處理過的濾紙上,以正丁醇-醋酸-水(4:1:5)展開,分離后白屈菜的斑點用含有金蓮橙OO(Tropaeolin OO)的pH4醋酸鹽緩沖液洗脫,然后用氯仿提取有色復合物(白屈菜堿與染料的結合物),氯仿層酸化后測定釋放出來的染料的顏色濃度,在515nm進行比色。

      (5)紫外分光光度法 取粉末用氯仿-油酸(99:1)提取,濃縮液點于硅膠G薄層板上,以氯仿-丙酮-乙酸乙酯-甲苯(2:1:1:1)展開,然后從薄層上挖取白屈菜 的斑點,用甲醇提取,并在293nm處測吸收度。

      (6)碘量法 取粉末3g用70%乙醇30g室溫振搖2 小時,過濾,取25g濾液蒸去乙醇,加入10%硫酸溶液 10滴,并加水到10g,過濾,取5g濾液用10%氫氧化銨溶液1ml堿化后以25g氯仿提取15分鐘,加黃芪膠振搖,用棉花過濾,取20g濾液蒸干殘渣溶于0.1N硫酸溶液中,加熱除去氯仿,并用0.1N硫酸溶液稀釋到 10ml,取此液一定量(相當于0.5g樣品)與10%硫酸溶液2ml和0.1N碘-碘化鉀溶液2ml混合,放置2分鐘后分出沉淀,溶于甲醇25ml(Ⅰ)中,用0.01N硫代硫酸鈉標準溶液滴定(1ml 0. 01N硫代硫酸鈉≈ 0.882 5mg白屈菜堿)。(Ⅰ)的溶液也可在470nm處測定吸收度,此法較靈敏,樣品中其他生物堿不干擾。

      (7)酸堿滴定法 取樣品用70%乙醇提取,濃縮后用硫酸酸化,過濾,用15%氫氧化鈉溶液堿化后以氯仿提取,提取液濃縮后加一定量0.1N鹽酸溶液,并置于水浴上加熱除去氯仿,然后用0.1N氫氧化鈉溶液滴定,以甲基紅-甲基藍混合液體為指示劑(1ml 0.1N鹽酸≈0.0353g白屈菜堿)。

      (8)血根堿的含量測定(比色法):含血根堿樣品的石油醚溶液用鹽酸提取,然后用堿堿化后以氯仿提取血根堿,加30%三氯化銻氯仿溶液形成橙色,進行比色。方法:取一定量樣品的石油醚提取液,置于分液漏斗中,加濃鹽酸10ml,充分振搖后加入10ml蒸餾水,分出酸層,移置于另一分液漏斗中,石油醚層再用含 1~2滴濃鹽酸的蒸餾水10ml提2次,合并酸液用1: 1氫氧化鈉溶液中和,冷卻后用氯仿提3次(10、10、 5ml),合并氯仿液于小燒杯中,蒸干并在100℃烤箱中干燥,殘渣用3ml干燥氯仿定量地移到比色管中,并加入30%三氯化銻的干燥氯仿溶液2ml,采用綠色濾光片進行比色。

      (9)總生物堿的測定:取樣品5g用60%乙醇提取 3次(100、100、50ml),每次加熱15分鐘,合并提取液,減壓濃縮至約50ml,加入濃硫酸30ml、醋酸溶液 30ml、鋅粒4g,加熱約1小時,直到溶液澄清,過濾,用少量含有硫酸的熱水洗滌,冷卻后以濃氨水中和,用乙醚提取3次(至提取液與碘化汞鉀試劑不反應為止),過濾,用無水硫酸鈉干燥,濾器用乙醚洗,濃縮后,抽空干燥除去乙醚,并干燥至恒重,準確加入氯仿50ml溶解,吸取氯仿溶液25ml,蒸干,殘渣溶于冰醋酸10ml 中,加入醋酐5ml和0.1%結晶紫指示劑3滴,用0.05 N或0.1N高氯酸冰醋酸溶液滴定到綠色為終點。總生物堿含量以白屈菜堿計 (1ml 0.05N高氯酸溶液≈ 0.017 65g白屈菜堿)。[2]

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