皮質類固醇是由腎上腺皮質內的膽固醇合成的。大多數類固醇合成反應由催化的酶的的細胞色素P450家族。它們位于線粒體內,需要腎上腺素氧還蛋白作為輔助因子(21-羥化酶和17α-羥化酶除外)。
醛固酮和皮質酮共享其生物合成途徑的xxx部分。最后一部分由醛固酮合酶(對于醛固酮)或11β-羥化酶(對于皮質酮)介導。這些酶幾乎相同(它們共享11β-羥基化和18-羥基化功能),但醛固酮合酶也能夠進行18-氧化。此外,在腎上腺皮質外緣的腎小球帶內發現醛固酮合酶;11β-羥化酶存在于束狀帶和腎小球帶中。