鹽酸平陽霉素與核酸相互作用的共振Rayleigh散射光譜及其分析應用

摘要 用共振Rayleigh 散射(Resonance Rayleigh scattering, RRS)光譜結合吸收光譜和熒光光譜研究了鹽酸平陽霉素(BleomycinA5, BLMA5)與核酸的相互作用. 在pH 2.2 左右的酸性介質中,BLMA5 能夠與核酸結合形成復合物, 引起RRS 顯著增強, 并產生新的RRS 光譜, 具有特征吸收波長紅移和分子吸收增色效應, 能觀察到BLMA5 的熒光猝滅. 不同核酸的RRS 光譜特征略有差異, 最大散射波長分別位于301 nm(ctDNA 和sDNA), 370 nm(hsDNA)和310 nm(RNAtypeⅢ和RNAtypeⅥ), 散射增強的程度各不相同, 其中DNA 的增強程度比RNA 大. 討論了BLMA5 和核酸反應的最佳反應條件及影響因素, 并對BLMA5 與核酸的結合模式、反應機理進行了討論. 建立了一種以BLMA5 為探針用RRS 法測定DNA 的高靈敏度、簡單、快捷的分析方法. 該方法的檢出限(3σ )分別為5.7 ng·mL?1(ctDNA), 7.4 ng·mL?1(sDNA), 9.2 ng·mL?1(hsDNA), 能用于痕量DNA 的測定.