一、檢測原理
本試劑盒是利用競爭ELISA方法，在酶標板微孔上預包被抗 硝基咪唑抗原。檢測時，加入標準品或樣品溶液，硝基咪唑抗體及酶標記物，包被抗原和加入樣本中的硝基咪唑競爭性地與硝基咪唑抗體結合后，再與酶標記物形成抗原抗體復合物，用TMB底物顯色；加入反應終止液，在450nm波長酶標儀下進行檢測，樣品中的硝基咪唑濃度與吸收光強度成反比。
二、檢測范圍
本試劑盒是應用ELISA技術研發的藥物殘留檢測產品,與儀器分析技術比較，能經濟、快速地檢測出蜂蜜中的硝基咪唑類藥物。
三、交叉反應率
與類似物的交叉反應率：
甲硝唑(MNZ) ………………………………………100%
二甲硝咪唑DMZ…………………………………… 168%
洛硝唑(RNZ) ………………………………………112%
異丙硝唑……………………………………………33%
四、試劑盒組成
酶標板1塊，96孔/板
標準液6瓶（1ml/瓶）：
0 ppb、0.05ppb、0.2ppb、0.8ppb、3.2ppb、12.8ppb
抗體工作液 ………………………7ml
酶標記物 ……………………… 12ml
底物液A …………………………7ml
底物液B …………………………7ml
終止液 …………………………7ml
20X濃縮洗滌液 ………………40 ml
2X濃縮復溶液 ………………50 ml
說明書 ……………………………1份
樣本處理步驟：
(A)蜂蜜（樣本稀釋倍數0.5）
（1）取3g蜂蜜，加3ml 0.1M 碳酸鹽緩沖溶液振蕩至蜂蜜全部溶解；
（2）加入9ml 二氯甲烷，振蕩5分鐘，室溫4000轉/分，離心5分鐘；
（3）去除上層雜質，取下層有機相6ml至另一離心管中，加入2ml二氯甲烷，2ml 2M氫氧化鈉溶液，室溫4000轉/分，離心5分鐘；
（4）取4ml清澈下層有機相至干燥溶器中，50℃水浴氮氣吹干；
（5）用0.5ml復溶工作液溶解干燥的殘留物，再加入正己烷1ml混合30秒，室溫3000轉/分以上，離心5分鐘；
（6）去除上層取下層50μl液體用于分析。