實驗概要
神經干細胞的建系培養
主要試劑
神經干細胞培養液
主要設備
移液槍、3.5 cm細胞培養皿
實驗步驟
(1)分離、分選得到的細胞用神經干細胞培養液培養,每2 d予以半量換液一次。注意換液時動作要輕,不要吸到神經球。
(2)培養2~4 d后可觀察到神經球在培養液中呈懸浮生長,每次分離得到的神經球記為一個系。
(3)隨著時間的推移神經球的數量迅速增加,在5~8 d時可形成很多的懸浮呈規則球形的細胞克隆,傳代時用移液器輕柔吹打球形克隆使其成為小的神經球和單細胞懸液,將部分細胞接種到新的培養皿中,細胞量約2×105細胞/35 mm皿。
(4)神經球可連續傳代獲得大量克隆細胞,每3~5 d傳代1次,每2 d半量換液1次。
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