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  • 發布時間:2019-04-06 22:46 原文鏈接: 神經組織染色實驗——神經纖維染色

    實驗方法原理神經纖維是由神經元的軸突和樹突等成分組成,經過銀染后,再用還原劑處理,使銀顆粒沉著于纖維和細胞中。常用 Bielschowsky 染色法。
    實驗材料

    石蠟組織切片

    試劑、試劑盒

    硝酸銀水溶液無水乙醇濃氨水蒸餾水二甲苯乙醇中性樹膠氯化金水溶液甲醛硫代硫酸鈉

    儀器、耗材

    濾紙37℃ 溫箱

    實驗步驟


    氨銀溶液:20% 硝酸銀水溶液 30 ml,無水乙醇 20 ml。將此兩液混合后呈現乳白色沉淀,逐滴加入濃氨水,使之形成的沉淀剛剛溶解,再滴加 5 滴濃氨水,過濾后使用。


    1. 石蠟組織切片厚度 8~15μm,常規脫蠟至水。


    2. 蒸餾水洗 1~2 min。


    3. 2% 硝酸銀水溶液在 37℃ 溫箱內浸染 25~35 min。


    4. 蒸餾水洗 2~3 min。


    5. 用 10% 甲醛溶液還原數秒鐘,至切片呈現黃色為止。


    6. 蒸餾水洗 3 min,用氨銀溶液滴染 20~40 s。


    7. 傾去染液,直接用 10% 甲醛溶液再次還原 1~2 min,使之切片呈棕黃色。


    8. 蒸餾水洗 3 min,0.2% 氯化金水溶液處理 3 min。


    9. 蒸餾水洗 1 min,5% 硫代硫酸鈉水溶液固定 3~5 min。


    10. 水洗 3~5 min,然后用濾紙將切片周圍水分吸干。


    11. 無水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。

    展開 
    注意事項


    1. 由于神經纖維的組織切片較厚,為防止脫片現象,所以最好用涂膠的載玻片進行撈片。


    2. 氨銀溶液作用后,切片上應保留些銀液,便于甲醛還原,使纖維著色較深。

    其他

    結果:神經元、軸突及神經纖維呈黑色。


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