第21屆色譜會大會報告（續）不斷挖掘色譜新潛力

　　分析測試百科網訊 2017年5月21日，第21屆全國色譜學術報告會及儀器展覽會繼陳洪淵、楊芃原、李攻科、王亞韡、王勇、和馮鈺锜6位專家精彩的報告后（相關報道：6位學者獻技第21屆色譜會 色譜“玩”出新花樣），中國科學院大連化學物理研究所許國旺、北京大學化學與分子工程學院劉虎威、浙江大學潘遠江、中國科學院蘭州化學物理研究所師彥平、清華大學化學系的林金明和中國科學院大連化學物理研究所張玉奎6位專家再次深挖色譜的新潛力。

中國科學院大連化學物理研究所 許國旺

　　來自中國科學院大連化學物理研究所的許國旺帶來了題為《如何從少量臨床樣本中獲取大量的代謝組信息？》的報告。

　　許國旺表示代謝組學是系統生物學的重要支撐平臺之一，并已在疾病研究中取得突破性進展，但是目前尚沒有一個方法滿足分析所有代謝組的要求，每個分析平臺只能測量10-15%代謝組信息，多個平臺的結合是唯一辦法。

　　許國旺構建了一種新型的停止流二維液相色譜-質譜系統（2D HILIC-RPLC），在提高分離度的同時不損失靈敏度。使用TRAP避免稀釋效應，改進一維和二維流動相的兼容性，保證從柱1流出的所有餾分在捕集柱中捕集。反吹可有效減少進樣峰寬，提高分離度。這種方法應用到不同生長年齡人參主根代謝差異研究中，統計分析共發現19種與生長相關的差異代謝物。

　　同時，許國旺還介紹了一種新型在線3D LC系統。使用自主設計的停留接口，將第一維預分離與LC×LC系統串聯，經第一維預分離，復雜樣品被分離獲得性質簡化的餾分，將性質簡化的餾分轉移至全二維部分進行分離，第一維分離停止。這種方法可用于極端復雜樣品的非靶向代謝組學分析，如大豆中黃酮類化合物的3DLC方法。

　　最后，許國旺總結：停止流2DLC增加代謝物覆蓋，適合于極性不同的化合物的分離；停止流3DLC增加代謝物覆蓋，適合于極端復雜樣品的分離；停止流平行分析一次進樣實現對非極性和極性、代謝組和脂質組的同時分析，適合于珍貴小樣品（如穿刺的組織、干細胞等）的分析；同時萃取（MTBE）代謝組和脂質組的同時萃取，適合于珍貴小樣品（如穿刺的組織、干細胞等）的GC、LC、CE分析。

北京大學化學與分子工程學院 劉虎威

　　來自北京大學化學與分子工程學院的劉虎威帶來了題為《脂質組學輪廓分析新方法》的報告。

　　劉虎威以正相/反相二維液相色譜-四級桿飛行時間質譜聯用(Normal-phase / reversed-phase two-dimensional liquid chromatography  -quadrupole time-of-flight mass spectrometry, NP/RP 2D LC-QToF MS) 為研究手段，以良/惡性乳腺腫瘤和一種小血管病誘發卒中的亞型-腔隙性腦梗死為研究對象，開展脂質組學研究，據此探究這兩種疾病的脂類生物標志物，并構建腔隙性腦梗死中的異常代謝網絡。

　　隨后劉虎威還介紹了2D SFC/RPLC-MS分析方法，這種方法為脂質組學的快速分析提供了潛在應用。

浙江大學 潘遠江

　　來自浙江大學的潘遠江帶來了題為《質譜中氣相離子反應研究》的報告。

　　潘遠江在有機反應中間體質譜分析工作中，介紹了為液相中的有機合成反應提供新穎的設計思路，各種反應中間體的高效捕獲揭示了反應歷程，反應中間體的高效捕獲揭示了新型的C-S鍵的活化過程。潘遠江以苯基乃春為例介紹了反應中間體活性研究，苯基乃春的再離子化以及反應活性測定可以幫助理解液相反應，但其不帶電荷，因此難以通過質譜直接研究其活性可以通過不同取代基的苯基乃春陽離子調控烷烴的活化能力。

中國科學院蘭州化學物理研究所 師彥平

　　來自中國科學院蘭州化學物理研究所的師彥平帶來了題為《色譜材料與技術應用》的報告。

　　師彥平表示色譜分離的核心是色譜柱，色譜柱的關鍵是色譜分離介質。離子液體設計固載在硅膠基質上，形成了多模式的新型色譜分離介質，硅基離子液體固定相減少峰拖尾，提高分離選擇性，縮短保留時間，離子液體在C18柱中形成了動態的離子液體薄膜，相當于動態涂覆的離子液體固定相。為了實現無機、有機陰離子和中性化合物的同時分離，陰陽離子的同時分離，制備了一類基于咪唑基團的分離介質，咪唑陽離子是一個大的芳香雜環陽離子，構建了新一代的離子色譜分離介質，這是首次將甲基咪唑離子液體鍵合在硅膠固定相，用于離子色譜，有效地分離了無機、有機陰離子。

　　師彥平介紹了有機無機雜化多功能手性色譜填料，這種填料容易調控有機/無機官能團配比，設計材料新功能，提高原有材料的拆分性能，如分離選擇性、化學穩定性、強度等。包括環糊精雜化手性填料、納米纖維素雜化手性填料等。

　　隨后，師彥平還介紹了聯吡啶修飾雜化整體柱、氣相色譜毛細管柱、氧化石墨烯修飾的逆流色譜柱和固相萃取納米材料等。

清華大學化學系 林金明

　　來自清華大學化學系的林金明帶來了題為《基于芯片電泳的人乳頭狀瘤病毒(HPV)基因分型篩查方法的研究》的報告。

　　林金明表示宮頸癌是威脅女性生命健康的第二大殺手，卻也是至今病因明確的唯一癌癥。超過 99%的宮頸癌與人乳頭狀瘤病毒(HPV)的感染有因果關系。因此，對HPV感染情況的篩查成為重要而有效的預防宮頸癌的早期篩查手段。

　　林金明介紹到實驗室針對三種不同的核酸擴增技術聯合芯片電泳對HPV 16 E6 / E7 mRNA檢測做了比較型的研究。結果表明，芯片電泳具有高通量、高可靠性的特點，相對于傳統耗時的毛細管電泳或分子信標檢測方法，檢測耗時大大縮短。建立了基于核酸序列擴增技術(NASBA)、一步法RT-PCR 和兩步法RT-PCR的HPV 篩查檢測技術。建立了基于聚合酶鏈式反應(PCR)，限制性片段長度多態性(RFLP)分析結合芯片電泳(MCE)的方法對HPV16和HPV18進行分型。以47種HPV類型為對象，與細胞學檢查和DNA測序方法對比，考察了其在宮頸脫落細胞樣品中的檢測效果。結果顯示陽性檢出率是傳統的細胞形態學檢查的4倍，檢測出單一感染占2/3，共測出11 種HPV類型，分型準確度大于90%。證明了PCR-RFLP-MCE自動分型方法的優越性以及用于輔助宮頸癌早期診斷的HPV篩查的可能性。

中國科學院大連化學物理研究所 張玉奎

　　來自中國科學院大連化學物理研究所的張玉奎帶來了題為《復雜體系的高效分離與表征——如何提高峰容量》的報告。

　　張玉奎介紹了一種膠體晶體-亞微米粒子，膠體晶體是由單分散的、直徑在微米或亞微米級別的無機或有機顆粒（也稱膠體顆粒）自組裝形成的高度有序陣列結構，亞微末級別的膠體晶體表面產生的滑流現象可以得到較窄的速率分布（dv/dr），減少區帶擴散，從而提高分離的分辨率。這種膠體晶體柱可用于分離抗體。

　　在提高峰容量方面，張玉奎還介紹了3.5米長整體柱分析E.Coli細胞胰蛋白酶酶解肽，2米長整體柱分析人誘導多能干細胞（iPSCs），乙烯基橋聯有機硅雜化整體柱，1.4米橋聯雜化柱分析Hela細胞酶解產物等。

　　隨后，張玉奎還介紹了一種新型高低PH值二維色譜分離磷酸肽新方法，實現了磷酸化蛋白質組的規模化分析，與PhosphoSitePlus網站收錄的磷酸化位點數據集（>25萬個位點）的對比分析，得到人肝組織最大的磷酸化位點數據集。

　　最后，張玉奎介紹了中國色譜研究的國際地位，他表示色譜及毛細管電泳相關論文十年總數量、每年文章數、每年被引次數和單篇引用次數，中國都處于領先地位。