1. 在3‘末端附近引入額外錯配
2. 腺苷三磷酸雙磷酸酶介導的等位基因特異PCR法(apyrase-mediated allelespecific extension, AMASE)
3. 焦磷酸解激活的聚合反應法(Pyrophosphorolysis-activated polymerization, PAP)
4. 改進酶效率
5. 鎖定的核酸技術(locked Nucleic Acid, LNA)