梅毒螺旋體、回歸熱螺旋體、鼠咬熱螺旋體和鉤端螺旋體等均對本品敏感。隨著臨床廣泛應用，細菌對本品的耐藥性日趨嚴重，其中尤以革蘭陽性球菌報道多見，常見的菌株有金葡菌、綠色鏈球菌、肺炎雙球菌等。細菌對本類抗生素產生耐藥的機制有：
1、細菌產生β內酰胺酶，使抗生素分解失活，如產酶金葡菌等，這是臨床上最常見的耐藥機制，對此的研究亦較深入、廣泛，
2、細菌細胞青霉素結合蛋自發生改變，使抗生素結合力降低或不能結合，如耐甲氧西林金葡菌（MRSA）等；
3、細菌細胞壁發生變化，通透性降低，使抗生素很少或無法到達作用部位，如耐藥淋球菌等；
4、細菌產生耐受性，似與細菌缺少自溶酶有關。當然，還可能有其他機制。