（一）植塊法：
植塊法原理是成纖維細胞的增殖速度要比施萬細胞快，通過反復的貼壁便可以獲得較高純度的施萬細胞。此方法培養的周期較長，且培養過程中伴隨著細胞活性及分裂能力的下降。
（二）酶消化法：
酶消化法的主要原理是用酶去除組織中的間質，使組織更為分散而使細胞呈單層排列。采用組織塊反復種植純化法、低濃度胰酶快速消化和差速貼壁法對施萬細胞進行純化，結果施萬細胞活性較高，純度可達90%以上，細胞所受到的外界因素影響也較少。
（三）三維培養法：
植塊法、酶消化法主要是基于二維培養方法，然而體外細胞培養的一個重要原則是需模擬體內細胞生長環境，該模擬系統中最重要的核心因素是細胞與培養環境之間的相互作用。不同于傳統的二維化單層細胞培養，三維細胞培養技術是將具有三維結構不同材料的載體與各種不同種類的細胞在體外共同培養，使細胞能夠在載體的三維立體空間結構中遷移、生長，構成三維的細胞載體復合物。三維細胞培養是將細胞培植在一定的細胞外基質中，細胞外基質蛋白充當生長支架，使得細胞能夠分化產生一定的三維組織特異性結構，所創建的細胞生長環境則最大程度地模擬體內環境。在施萬細胞的培養中也有學者采用該方法進行培養，在培養液中放入三維支架，使細胞貼壁，形成Bungner帶，支架的主要材料是膠原，其次還有聚酯纖維、聚乳酸等。有研究者采用三維自組裝多肽水凝膠作為基質三維培養人胎兒施萬細胞，結果培養出的施萬細胞活性較高，細胞形態更加典型，且0.25%水凝膠效果最佳，能夠形成良好的形成納米纖維支架結構。