A. 核糖體的前期準備
(1)eIF1,3,5圍繞E位點結合至小亞基,eIF1A圍繞A位點結合至小亞基;
(2)eIF2·GTP在胞質中結合Met-tRNA形成三原復合物;
(3)三原復合物進一步結合到小亞基復合物(小亞基以及eIF1,1A,3,5)中小亞基P位點上形成43S復合物;
B. mRNA的準備
(1)eIF4E識別mRNA的5‘端帽子;
(2)eIF4G作為支架蛋白結合至eIF4E并連接eIF4A,eIF4A結合至mRNA上;
(3)eIF4B和eIF4A互作,激活eIF4A的活性;
(4)eIF4A利用其解旋酶活性解旋mRNA,去除其二級、三級結構;
C. mRNA的裝載
(1)43S復合物通過eIF3和eIF4E互作,eIF1A和eIF4A互作將mRNA進行招募形成48S復合物;
(2)eIF4A利用其解旋酶活性,充當轉位酶作用,移動mRNA進行掃描;
(3)遇到第一個起始密碼子AUG后,密碼子和tRNA配對,阻礙了eIF4A的轉位,掃描停止;
(4)二者的配對,刺激eIF2的GTP水解,eIF2·GDP和小亞基親和力較低,從小亞基復合物上脫離下來,伴隨著其他除eIF4A以外的起始因子全部脫離;
(5)eIF5B·GTP被起始tRNA和eIF1A招募;
D. 大亞基的裝載
(1)eIF5·GTP招募大亞基;
(2)大亞基的結合刺激eIF5上的GTP水解,eIF5·GDP親和力較低,從核糖體上脫離下來;
(3)大亞基獲得更高親和力,進一步將eIF1A置換出來,進入起始狀態。