1.取5支無菌有塞試管,各加患者無菌脫纖維血2 mL。其中2支加入無菌葡萄糖液(或ATP液)0.1mL,混勻。另外3支加9 g/L NaCl液0.1mL。
2.將加葡萄糖和不加葡萄糖的試管各2支置于37℃孵箱中,塞緊,另1支不加葡萄糖管則放在冰箱中保存。抽正常人血液,按相同的方法操作,以作為對照。
3.24小時后取出加葡萄糖和不加葡萄糖的試管各1支,充分混勻后取出1 mL,測量紅細胞比積。另1mL在離心沉淀后分出血清。
4.取0.2mL血清,加HiCN稀釋液9.8mL混勻。
5.從冰箱取出不孵育管的全血并充分混勻,吸取20μL加HiCN稀釋液9.98mL,充分混勻。其余血液離心沉淀后分離血清。
6.吸取血清0.2mL加HiCN稀釋液9.8mL,用作空白管。
7.上述各管用空白管調零點,以540nm處測定各管吸光度。