糧食中赭曲霉毒素A的測定高效液相色譜法和熒光光度法(Classic PAX(混合型陰離子交換柱), P/N: SAC-PAX06150 )
1.實驗材料
固相萃取柱:Classic PAX(混合型陰離子交換柱 (150mg/6mL)
2.樣品制備
2.1 玉米:稱取試樣10g(精確至0.01g),加入三氯甲烷 50mL和5mL 0.1mol/L的磷酸溶液,于振蕩器上振蕩提取 3~5分鐘,提取液用濾紙過濾,取下層濾液 10mL放入100mL平底燒瓶中,于水浴中 40℃用旋轉蒸發儀旋轉蒸發至接近干涸,用20mL石油醚溶解殘渣,加入 10mL提取液,再用振蕩器振蕩提取 3-5分鐘,靜置分層后取下層溶液,用濾紙過濾,取濾液5mL進行固相萃取。
2.2 稻谷(糙米)、小麥、小麥粉、大豆:稱取試樣 10g(精確至0.01g),加入提取液50mL,于振蕩器振蕩提取 3~5分鐘,用濾紙過濾,取濾液10mL放入100mL平底燒瓶中,加入20mL石油醚,振蕩器振蕩提取3~5分鐘,靜置分層后取下層溶液,用濾紙過濾,取濾液5mL進行固相萃取凈化。
3.凈化
用5mL甲醇沖洗Classic PAX(混合型陰離子交換柱)固相萃取柱,再用 3mL提取液潤洗。然后將 5mL樣品提取液加入柱子中,調節流速以 1滴/s ~ 2滴/s的速度通過柱子,再以同樣的流速用3mL淋洗液洗柱,然后用1.2mL蒸餾水快速沖洗柱子,用空氣或氮氣吹盡柱子中的液體。最后用4-5mL洗脫液快速洗脫赭曲霉毒素A并收集洗脫液于玻璃試管中,于45℃下在氮吹儀上用氮氣吹干溶劑。用流動相溶解殘渣并定容到1.0mL(或者洗脫液收集于一個50mL的平底燒瓶中,于40℃以下水浴中,10分鐘內旋轉蒸發至干,用1.0mL流動相溶解殘留物),經針式過濾器過濾后備用。
4.色譜條件
流動相:96mL乙腈、102mL水和2mL冰醋酸混合,用0.2μm濾膜過濾并脫氣。
流速:1.0mL/min
熒光檢測器:激發波長333nm,發射波長460nm
進樣量:20μL