精浴液化后,取混勻的精液標本1滴于潔凈的載片上加蓋玻片后,先以低倍鏡觀察有無精子,以及精子是否活動.若不見精子,將標本離心,沉渣中有無精子,若兩片全無精子,應報告無精子,勿須作其它試驗。本實驗來源于牡丹江醫學院 本科 5 年制檢驗專業實驗指導
實驗方法原理 一、精子活動率檢查
用低倍鏡觀察有無精子的濕片,隨即轉為高倍鏡,至少觀察100個精子中,有尾部運動的精子所占的百分率即為活動率,計算公式為:
精子活動率%=(活動精子數/活動精子數十不活動精子數)× 100
二、精子活動力檢查:
檢查精子活動率的同時,將活動力按下列標準分級
0級 不活動 死精子
Ⅰ級 活動不良 精子動作遲鈍原地轉動
Ⅱ級 活動較好 精子活動,但方向不定
Ⅲ級 活動良好 精子呈有線活潑運動
正常精液 于排精后1小時Ⅱ級精子60%
三、精于形態學檢查
1、精子密度>15×109/L的精液;可將液化精液直接涂片,<15×109/L的精液先要液化精液1500r/min離心10分鐘,取沉淀物涂片。
2、將涂片空氣中自然干燥,甲醛固定5分鐘,用HE染色,3、待染片干燥后,在油鏡下計數200個精子,報告正常異常出現率。2形態觀察正常精子有頭部,中間段與足部,HE染色頭呈紫色,尾部呈白色或紫色。
四、精子密度與精子總數檢查
1. 粗略估計法:將液化精液混勻后直接涂片,加蓋玻片后在高倍鏡下(40×)觀察5個視野,取其平均數×109,即每升大概的精子數
精子讀數
一、實驗原理:用NaHCO3破壞精液的粘稠性,以甲醛固定精子,將精液定量稀釋后進行計數。
實驗材料 精液稀釋液
試劑、試劑盒 NaHCO3濃甲醛液蒸餾水
實驗步驟
實驗試劑:精液稀釋液 NaHCO3 5g濃甲醛液1ml,蒸餾水加至100ml.
實驗操作:
1. 取稀釋液0.38ml于小試管中。
2. 用血紅Pr吸取己液化混勻的精液20微升,加至稀釋液內,稀釋20倍。
3. 將稀釋液混勻后.充入細胞計數室內.
4. 靜置5分鐘,讓所有精子沉積下來,然后用高倍鏡計數,中央大方格內四角和正中央共5個中方格內的精子數,計數以頭部為主.
實驗計算:精子數/L=5個中方格內精子數×109