在索氏提取器中,經典的莫過于根據索氏抽提原理、用重量法來測定脂肪含量。
抽提法是測定粗脂肪含量*普遍的方法,抽提法利用重量法的原理,即先將樣品溶于脂肪溶劑中,然后利用索氏提取器將脂肪循環抽提,*后再測出抽提前后儀器的重量差,即脂肪的重量。抽提法需要嚴格的實驗過程,如果過程沒有掌握好,很可能嚴重影響到脂肪的*后含量。下面,我們主要來看看用索氏抽提法測定脂肪時應該注意的事項。
(1)樣品應干燥后研細,裝樣品的濾紙筒一定要緊密,不能往外漏樣品,否則重做。
(2)放入濾紙筒的高度不能超過回流彎管,否則乙醚不易穿透樣品,脂肪不能全部提出,造成誤差。
(3)碰到含多量糖及糊精的樣品,要先以冷水處理,等其干燥后聯通濾紙一起放入提取器內。
(4)提取時水浴溫度不能過高,一般使乙醚剛開始沸騰即可(約45℃左右)。回流速度以每8-12次/時為宜。
(5)所用乙醚必須是無水乙醚,如含有水分則可能將樣品中的糖以及無機物抽出,造成誤差。
(6)用于樣品測定脂肪,可按下式計算原來樣品脂肪的含量.
脂肪(﹪)=( W1-W0)/W*(100-A)
脂肪(%)= 物的耐鹽性得到不同程度提高。其中Zhang和Blumwald(2001)、Zhang等(2001)報告的轉AtNHX1基因番茄可耐200mmol/L的氯化鈉,并把吸收的鈉鹽積累在葉片中,而果實的品質不受影響。這些研究預示著在提高植物耐鹽性方面,離子的選擇吸收和跨膜運輸的基因工程是植物耐鹽性種質改良的有效途徑。
A-100克樣品水分的含量(克).
(7)冷凝管上端*好連接一個氯化鈣干燥管,這樣不僅可以防止空氣中水分進入,而且還可以避免乙醚揮發在空氣中,這樣可防止實驗室微小環境空氣的污染。如無此裝置,塞一團干脫脂棉球亦可。
(8)如果沒有無水乙醚可以自己制備,制備方法如下:在1000毫升乙醚中,加入無水石膏50克,振搖數次,靜置1 0小時以上蒸餾,收集35℃以下的餾液,即可應用。
(9)將提取瓶放在烘箱內干燥時,瓶口向一側傾斜45℃放置使揮發物乙醚易與空氣形成對流,這樣干燥迅速。
(10)樣品及醚提出物在烘箱內烘干時間不要過長,因為一些很不飽和的脂肪酸,容易在加熱過程中被氧化成不溶于乙醚的物質;中等不飽和脂肪酸,受熱容易被氧化而增加重量.在沒有真空干燥箱的條件下,可以在100-105℃干燥1.5-3小時。
(11)如果沒有乙醚或無水乙醚時,可以用石油醚提取,石油醚沸點30-60℃為好。
(12)使用揮發乙醚或石油醚時,切忌用直接火加熱。應用電熱套電水浴,電燈泡等.
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