紫外分光光度法測定維生素B1片的含量

紫外分光光度法測定維生素B₁片的含量

摘  要   本試驗采用紫外分光光度法對維生素B1片的含量進行測定，對此法進行方法驗證，證明了此法具有專屬性高，回收率高、精密度高，線性好、測定范圍寬的特點，并對數據處理方法進行了比較，發現采用對照品比較法進行數據處理受儀器波動影響較小，測定結果可信度較高。

關鍵詞   維生素B1  紫外分光光度法   含量測定    方法驗證   對照品比較法

維生素B1及其制劑及其制劑常采用的方法有非水滴定法，紫外分光光度法和硫色素熒光法。中國藥典用非水溶液滴定法測定原料藥，片劑和注射劑采用紫外分光光度法，USP采用硫色素熒光法。采用非水溶液滴定法可能受到氫鹵酸鹽的干擾，對操作人員要求較高，采用硫色素滴定法不受氧化破壞產物的干擾，測定準確但操作繁瑣，且熒光測定受干擾因素較多，本實驗采用紫外分光光度法進行含量測定。

1   實驗裝置及試劑

1.1  儀器  BS210S型天平，UV751GD型紫外/可見分光光度計。

1.2  實驗材料  維生素B1片（來源：成都第一制藥，規格：1--00片*10mg，批號：061204），維生素B1標準品（分析純），維生素B1對照品（200ug/ml，2.0mg/ml），維生素B1標準溶液（0.250mg/ml），空白輔料，鹽酸溶液（9→1000）。

2   實驗方法

  處方分析：

    根據處方量分析，維生素B₁含16.39%，輔料含83.61%。平均片重約61mg，取相當于25mg維生素B₁的片粉約0.15g。

1、測定方法：

取供試品20片，精密稱定，研細，稱取片粉適量（約相當于維生素B₁25mg），置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→1000）約70ml，振搖15min使維生素B₁溶解，再加鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取續濾液5ml，置另一100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法，在246nm的波長處測定吸收度，按C₁₂H₁₇ClN₄OS.HCl的吸收系數為421計算，即得。

2、方法驗證

2.1.線性和范圍

精密稱取維生素B₁對照品約25mg，置100 ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→1000）溶解并稀釋至刻度，制備成含維生素B₁ 250μg/ml的對照溶液。分別精密量取該溶液3、4、5、6、7ml置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，即得系列濃度的對照品溶液，照分光光度法，在246nm的波長處測定吸收度，以吸收度（A）對濃度（C）回歸處理，得標準曲線和回歸方程。

2.2. 回收試驗（準確度試驗）

對照品溶液的制備：對照品溶液的制備，同2.1項下。

供試品溶液的制備：精密稱取維生素B₁精制原料約0.25g，置50ml量瓶中，加入鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，制成5.0mg/m維生素B₁溶液儲備液；分別精密量取該溶液4、5、6ml置已加入比例量輔料（0.15g，1/100天平）的100ml量瓶中（一式三份），加鹽酸溶液（9→1000）約70ml，振搖使之溶解，再加鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，濾過，精密量取續濾液5ml，置另一100ml量瓶中，搖勻，得高、中、低三種濃度的試驗溶液，照分光光度法，在246nm的波長處測定吸收度，用對照品比較法計算含量。

2.3、精密度試驗

取供試品20片，精密稱定，研細，稱取片粉適量（約相當于維生素B₁25mg），一式5份，置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→1000）適量，振搖15min，再加鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液5ml，置另一100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，即得約含維生素B₁12.5ug/ml的供試品溶液。

另取維生素B₁對照品適量，用鹽酸溶液（9→1000）稀釋制成12.5μg/ml的對照品溶液。照分光光度法（ChP2005二部附錄IVA）在246nm處分別測定供試品溶液和對照品溶液的吸光度，用百分吸光度和對照品比較法分別進行計算，即得。

表1                  維生素B1標準曲線的制備

圖2                   維生素B1標準曲線圖

由圖2可得，采用此法進行維生素B1含量的測定，在濃度為8.00-16.00ug/ml

范圍內線性關系較好（R2=0.9997）。

表2                 維生素B1片回收率實驗結果