紫外可見分光光度計穩定性(Stability)

一、穩定性對分析測試誤差的影響
    許多科技工作者經常把基線漂移說成穩定性, 他們認為基線漂移小就是穩定性好, 其實這是不全面的。因為, 紫外可見分光光度計的穩定性應包括基線漂移( Baseline Drift ) 和光度重復性( Photomet ric Reproducibility ) 兩個方面。使用紫外可見分光光度計或制造紫外可見分光光度計時, 都有一個很重要的原則或宗旨, 這就是儀器要穩定可靠。如果一臺儀器的穩定性差, 就不可能得到好的分析測試結果。儀器的穩定性好壞, 是挑選紫外可見分光光度計儀器或使用紫外可見分光光度計的關鍵問題之一。
    不能只是單純的把基線漂移作為穩定性, 真正的穩定性好的含義, 必須是包括基線漂移和光度重復性。如果一臺紫外可見分光光度計的基線漂移不好,在整個分析測試過程中始終在漂移, 根本穩定不下來; 或重復性不好, 每次測試的結果都不能重復, 這肯定不是好儀器。
二、紫外可見分光光度計穩定性的測試方法
( 一) 基線漂移的測試方法
    紫外可見分光光度計冷態開機( 關機2h 后開機) , 預熱2 h 后, 設置儀器的參數為: 試樣和參比比色皿都為空氣, 吸光度為0Abs , 光譜帶寬為2nm,掃描方式為時間掃描。連續測試1h , 取這1h 內, 最大最小值之差即是基線漂移。也有人取1h 內漂移線的包羅線之中線的最大最小值之差作為基線漂移,這種作法是可以的。     連續測試1h 是與國際接軌的測試方法, 然而有許多制造廠商往往采用10min 或30min 等的測試時間, 這是不對的。因為, 使用者作一個實驗, 在10min 內還未做完, 儀器的基線已經漂掉了, 這怎么能保證使用者的分析測試數據的可靠性呢? 30min 的測試時間也不科學, 因為在紫外區一般用氘燈, 它是一種氣體放電燈。從物理學或氣體發光的理論來講, 一般的氣體放電燈, 要在30min 左右其發光才能達到穩定。10min 時, 燈泡的發光也未達到最佳值,何況還有其他很多因素決定了儀器還未到達測試穩定性的時間。所以說測試
1h 才是正確的。
    目前, 還有人在測試基線漂移時, 光度單位設為透射比( % T ) , 這是可以的, 但沒有設置吸光度單位好。因為, 使用者一般多用吸光度( Abs) ,而不用或很少用透射比( % T ) 。并且, 國外的紫外可見分光光度計一般用吸光度( Abs) 來表示基線漂移, 將透射比( %T ) 換算吸光度( Abs) 比較麻煩。
( 二) 光度重復性的測試方法
    光度重復性的測試方法有幾種: 其一是儀器冷態開機, 預熱0. 5h 后, 由同一操作者, 用某種實際樣品, 對儀器的光度值( 吸光度或透射比均可) 進行測定。一般是連續測量3 次, 取測量值中的最大最小值之差作為光度重復性,也有人測量5 次或7 次。我國的紫外可見分光光度計國家標準和我國的紫外可見分光光度計計量檢定規程, 規定測試3 次。
    光度重復性的測試方法也可用標準物質( 溶液) 或標準片來進行。具體操作方法是儀器冷態開機, 預熱0. 5h 后, 在用標準片來測試時, 參考為空氣。