紫外線滅菌

實驗概要

了解紫外線滅菌的原理和方法。

實驗原理

　　
紫外線滅菌是用紫外線燈進行的，波長為200—300nm的紫外線都有殺菌能力，其中以260nm的殺菌力最強。在波長一定的條件下，紫外線的殺菌效率與強度和時間的乘積成正比。紫外線殺菌機制主要是因為它誘導了胸腺嘧啶二聚體的形成，從而抑制了DNA的復制。另一方面，由于輻射能使空氣中的氧電離成[O]，再使O2氧化生成臭氧（O3）或使水（H2O）氧化生成過氧化氫（H2O2），O3和H2O2均有殺菌作用。紫外線穿透力不大，所以，只適用于無菌室、接種箱、手術室內的空氣及物體表面的滅菌。紫外線燈距照射物以不超過1．2m為宜。

　　
此外，為了加強紫外線滅菌效果，在打開紫外線燈以前，可在無菌室內（或接種箱內）噴灑3—5％的石炭酸溶液，一方面使空氣中附著有微生物的塵埃降落，另一方面也可以殺死一部分細菌。無菌室內的桌面，凳子可用2—3％的來蘇爾擦洗，然后再開紫外線燈照射，即可增強殺菌效果，達到滅菌目的。

主要試劑

3—5％石炭酸或2—3％來蘇爾溶液

主要設備

紫外線燈

實驗材料

牛肉膏蛋白胨平皿

實驗步驟

　　
1．單用紫外線照射

　　
（1）在無菌室內或在接種箱內打開紫外線燈開關，照射30分鐘，將開關關閉。

　　
（2）將牛肉膏蛋白胨平皿蓋打開15分鐘，然后蓋上皿蓋，置37℃培養24小時。共做三套。

　　
（3）檢查每個平皿上生長的菌落數。如果不超過4個，說明滅菌效果良好，否則，需延長照射時間或同時加強其他措施。

　　
2．化學消毒劑與紫外線照射結合使用

（1）在無菌室內，先噴灑3—5％的石炭酸溶液，再用紫外線燈照射15分鐘。

　　
（2）無菌室內的桌面、凳子用2—3％來蘇爾擦洗，再打開紫外線燈照射15分鐘。

　　
（3）檢查滅菌效果[方法同“單用紫外線照射”（3）]。

　　由于紫外線對眼結膜及視神經有損傷作用，對皮膚有刺激作用，所以，不能直視紫外線燈光，更不能在紫外線燈光下工作。