⑧高鐵血紅蛋白還原試驗。原理:高鐵血紅蛋白須依靠還原型輔酶Ⅱ (NADPH)供氫而還原成還原血紅蛋白。在G-6-PD缺乏時,因NADPH生成減少,故高鐵血紅蛋白的還原少于正常。
正常值:>75%。
臨床意義:G-6-PD缺乏時,高鐵血紅蛋白還原率一般低于30%。此法簡單易行,適用于過篩檢查,但可有假陽性反應。
⑨變性珠蛋白小體檢查。原理:在抗凝血中加入氧化劑乙酰苯肼,經37℃孵育后再用甲紫作活體染色,在G-6-PD缺乏的紅細胞內可出現藍色變性珠蛋白小體。 正常值:含5個以上變性珠蛋白小體的紅細胞占0~28%。在G-6-PD缺乏者平均可達67.8%(45~92%)。
臨床意義:作為檢查G-6-PD缺乏的過篩試驗。但缺乏特異性,也可見于不穩定血紅蛋白病的紅細胞。
⑩血紅蛋白電泳。原理:大部分異常血紅蛋白的等電點不同,所以在使用不同緩沖液的電泳中的泳動速度不同,而形成各種不同的區帶。故可由電泳圖形鑒別各類異常血紅蛋白的性質及其含量。
臨床意義:此檢查為診斷地中海貧血及大多數異常血紅蛋白(Hbs、Hbc、HbD、HbH)的可靠方法。
?抗堿血紅蛋白(HbF)測定。原理:血紅蛋白A置于堿性溶液中即發生變性沉淀,且不能通過濾紙。血紅蛋白F對堿有較強的耐力,故用堿變性試驗可測定。
正常值:成人血液中血紅蛋白F的含量不超過2%。
臨床意義:β珠蛋白生成障礙性貧血時,HbF顯著增多,達10%以上。在急性白血病和再生障礙性貧血的病人也可輕度增多。
?血紅蛋白H包涵體生成試驗。原理:血紅蛋白H在體外極易變性和沉淀。使用煌焦油藍染色,于37℃保溫15分鐘,能使血紅蛋白 H在細胞中形成大小不等,數量不一,分布不均的深藍色包涵體。
正常值:陰性。
臨床意義:此試驗陽性可診斷血紅蛋白H病。不穩定血紅蛋白亦可呈陽性結果,但須保溫24小時。
?血紅蛋白c試驗。原理:血紅蛋白c病的紅細胞中可見棒狀或六角形結晶。當細胞置于3%氯化鈉液中,于37℃溫育1小時后,帶有Hbc的紅細胞內結晶體更易顯出。
臨床意義:此試驗可協助診斷血紅蛋白c病。
?紅細胞鐮變試驗。含有血紅蛋白 s的紅細胞在缺氧的情況下,易發生鐮形變化。用于確診血紅蛋白s病。
?異丙醇試驗。正常血紅蛋白加入異丙醇孵育于37℃40分鐘后方出現沉淀,而不穩定血紅蛋白孵育5分鐘即可出現沉淀。用于診斷不穩定血紅蛋白,其診斷價值高于變性珠蛋白小體檢查。
免疫性溶血性疾病的抗體檢查 包括以下檢查:
①抗人球蛋白試驗。此試驗系檢查不完全抗體的一種敏感的方法。完全性抗體被紅細胞吸附后與抗原相遇,在生理鹽水中可發生凝集反應。而不完全抗體不能與含有相應抗原的紅細胞發生凝集。不完全抗體致敏的紅細胞表面,吸附有一層不完全抗體(屬于免疫球蛋白IgG),當加入抗人球蛋白的血清后,使致敏紅細胞發生凝集,顯示出不完全抗體的存在。抗人球蛋白測定分直接法與間接法。直接法系檢查紅細胞是否吸附有不完全性抗體,間接法系檢查血清中有否不完全性抗體。
正常值:陰性。
臨床意義:抗人球蛋白試驗呈陽性反應者,見于新生兒溶血病、自身免疫性溶血性貧血、溶血性輸血反應等。
②冷凝集素試驗。原理:許多人體內含有低效價的冷凝集素(屬 IgM抗體)。在冷凝集素病患者的血清中,其效價明顯增高。冷凝集素是一種可逆性抗體,在低溫時可與自身紅細胞或“O”型紅細胞發生凝集,當溫度增高時,凝集塊又復消失。
正常值:效價為1:8~16。
臨床意義:陽性結果用于診斷冷凝集素病。但有些冷抗體型自身免疫性溶血性疾病亦可呈陽性結果。
③冷-熱溶血試驗。陣發性冷性血紅蛋白尿癥患者的血清中有一種依賴補體的自身雙相溶血素(屬IgG),在0~4℃時,此溶血素與紅細胞結合,并吸附補體,但不溶血。若升溫至30~37℃即發生溶血。
正常值:陰性。
臨床意義:用于確診陣發性冷性血紅蛋白尿癥。