紅細胞比容的測定

實驗概要

學習和掌握測定紅細胞比容的方法。

實驗原理

將定量的抗凝血灌注于特制的毛細玻璃管中，定時、定速離心后,有形成分和血漿分離，上層呈淡黃色的液體是血漿，中間很薄一層為灰白色，即白細胞和血小板（或栓細胞），下層為暗紅色的紅細胞，彼此壓緊而不改變細胞的正常形態。根據紅細胞柱及全血高度，可計算出紅細胞在全血中的容積比值，即為紅細胞比容（壓積）。

主要試劑

草酸鹽抗凝劑(0.8 g草酸鉀?H2O   1.2 g草酸銨?H2O   甲醛1 ml   蒸餾水至100 ml)或10 g?L-1肝素，橡皮泥或半融化狀態石蠟，75%酒精。 

主要設備

溫氏分血管,普通離心機，注射器，長針頭，干棉球。

實驗材料

雞

實驗步驟

1. 溫氏分血管比容法 

　　（1）取大試管和溫氏分血管各一支，用抗凝劑處理后烘干備用。 
 

　　（2）取血：可采取靜脈取血或心臟取血，將血液沿大試管壁緩慢放入管內，用涂有凡仕林的大拇指堵住試管口，緩慢顛倒試管2～3次，讓血液與抗凝劑充分混勻，并不能使血細胞破碎，制成抗凝血。 用帶有長注針頭的注射器，取抗凝血2 ml將其插入分血管的底部，緩慢放入，邊放邊抽出注射針頭，使血液精確到10 cm刻度處。 
 

　　（3）離心：將分血管以3000 r?min-1離心30 min，取出分血管，讀取紅細胞柱的高度，再以同樣的轉速離心5 min，再讀取紅細胞柱的高度，如果記錄相同，該讀數的1/10即為紅細胞比容。 

注意事項

1.選擇抗凝劑必須考慮到不能使紅細胞變形、溶解。草酸鉀使紅細胞皺縮，而草酸銨使紅細胞膨脹，二者配合使用可互相緩解。魚類多用肝素抗凝。 

　　
2.血液與抗凝劑混合、注血時應避免動作劇烈引起紅細胞破裂。 

　　
3.用抗凝劑濕潤的毛細玻璃管（或溫氏分血管）內壁后要充分干燥。血液進入毛細管內的刻度讀數要精確，血柱中不得有氣泡。