基本方案
| 實驗方法原理 | |
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| 實驗材料 | 纖維素粉 |
| 試劑、試劑盒 | NaHCO3-NaIO4 碳酸鈉緩沖液。NaBH4 溶液 乙酸鈉-乙酸 PBS |
| 實驗步驟 |
實驗所需「試劑」具體見「其他」 將 2 g 纖維素懸浮于 40 ml 0.1 mol/L NaHCO3-0.06 mol/L NaIO4 中,黑暗條件下放置 2 h,然后在玻璃料上用 0.1 mol/L pH 9.0 碳酸鈉緩沖液沖洗。在 40 ml 緩沖液中加入待固定的蛋白質(約 1 mg/ml),室溫振蕩過夜。為去除希夫堿,在溶液中加入 2 ml NaBH4,室溫振蕩 30 min。之后再次加入 2 ml NaBH4,室溫振蕩 30 min。用 0.1 mol/L pH 4.0 乙酸鹽-乙酸、PBS 和 0.05% 的吐溫 20 沖洗固體材料。
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| 注意事項 | |
| 其他 |
試劑: 0.1 mol/L NaHCO3-0.06 mol/L NaIO4(NaHCO3,Mr=84.0;NaIO4,Mr=213.9;8.4 g NaHCO3 ,12.8 g NaHCO3 溶于 100 ml H2O) 0.1 mol/L 碳酸鈉緩沖液(NaHCO3-Na2C03),pH 9.0 NaBH4 溶液(0.1 g NaBH4 溶于 10 ml 0.1 mol/L NaOH,現配) 0.1 mol/L 乙酸鈉-乙酸,pH 4.0 PBS(磷酸緩沖液:10 mmol/L 磷酸二氫鉀-鈉,pH 7.2,0.8% NaCl,0.02% KCl) 0.05% 吐溫 20 溶于 PBS
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