紙層析分離中的點樣后展開前,將濾紙和層析缸用配好的溶劑蒸汽來飽和,這個過程稱為平衡。
若不經過平衡,濾紙和層析缸未被溶劑蒸汽飽和,在層析過程中濾紙會從溶劑中吸收水分,溶劑會從濾紙表面揮發,從而改變溶劑系統的組成,嚴重時濾紙上會出現不同水平的溶劑前沿,嚴重影響層析效果。
平衡一般在密閉的層析缸內進行,所用溶劑必要時用離心機進行預處理。