• <noscript id="yywya"><kbd id="yywya"></kbd></noscript>
  • 發布時間:2019-04-28 20:49 原文鏈接: 細胞介導細胞毒作用檢測法5:用MTT檢測法測定CMC

    MTT檢測法測定CMC

    1. Fen細胞培養于含10%小牛血清的RPMI-1640培養液中,在625px2培養瓶中生長到接近匯合。用含0.05%胰蛋白酶,0.02 EDTAPBS消化細胞5分鐘,洗滌后,用細胞培養液將細胞配成1×105/ml

    2. 96孔細胞培養板,每孔加0.1ml細胞懸液,在37 5 CO2的飽和水汽二氧化碳培 養箱中培養24小時,讓細胞帖壁。每孔加0.1ml效應細胞懸液,效靶比101501,繼續培養4小時,讓效應細胞發揮殺傷效應。實驗中,設立只有靶細胞的無殺傷對照和只有 效應細胞的陰性對照,每種處理設3各復孔。

    3. 用含2%小牛血清的RPMI-1640培養液洗滌各孔 3次,洗去不粘附的細胞。每孔加 0.1ml2%小牛血清的RPMI-1640培養液和10μl 5mg/mlMTT染液,繼續培養3小時。

    4. PBS洗滌2次,每孔加0.1ml0.04mol/L HCl的異丙醇,室溫30分鐘,溶解形成的結晶。在570nm波長處,用酶聯檢測儀檢測各孔的光吸收值(OD)。

    殺傷活性(%)=(OD實驗孔-OD陰性對照) /OD無殺傷對照× 100




  • <noscript id="yywya"><kbd id="yywya"></kbd></noscript>
  • 东京热 下载