細胞凋亡（apoptosis）是一種由基因控制的細胞自主性死亡方式。其發生誘因及形態學特征均有別于壞死，與人類免疫系統的發生發展、神經組織發育、器官的形成、腫瘤的發生發展等諸多生物學現象之間有著密切聯系，并且是免疫應答過程中免疫細胞的殺傷機制之一。細胞凋亡的檢測技術已成為免疫學檢測的一個重要內容。凋亡細胞具有典型的形態學、生物化學及分子生物學變化，從這些特點出發發展起來的檢測方法有形態學鑒定、電泳法、免疫學方法、流式細胞術、原位末端轉移酶標記技術、靶細胞DNA片段的定量等。
(一)放線菌酮制備大鼠淋巴細胞凋亡模型
【原理及意義】
放線菌酮（CHX）是一種蛋白合成抑制劑，可誘導小鼠和大鼠的脾、粘膜免疫系統及淋巴結的淋巴細胞發生凋亡。此實驗旨在體外研究淋巴細胞凋亡的生物學特征。
【材料】
１動物：昆明種小白鼠，大鼠。
２試劑：PBS緩沖的4%多聚甲醛或2.5%的戊二醛，放線菌酮（用PBS或生理鹽水配成1mg/mL的濃度，除菌過濾，4℃冰箱保存）。
３器材：眼科鑷，眼科剪，剪刀，玻片。
【方法】
１大鼠用乙醚麻醉后，從腹腔（靜脈或皮下）給大鼠注射3mg/kg體重CHX。
２注射2h后，取大鼠脾臟（腸或子宮亦可）等組織，剪成一定大小的組織塊，固定于固定液中。
３固定組織經HE染色作光鏡檢查或電鏡檢查。
【結果】
一般在注射后不久就可在脾及其它粘膜免疫系統出現大量凋亡的淋巴細胞（以Ｂ淋巴細胞為主）。經HE染色后在光學顯微鏡下細胞核呈藍黑色，胞漿呈淡紅色。凋亡細胞在組織中單個散在分布，表現為核染色質致密濃縮，核碎裂等。壞死組織則呈均質紅染的無結構物質，核染色消失。
【注意事項】
由于機體內巨噬細胞對凋亡細胞的清除作用，凋亡細胞形成的高峰期在3h左右，在5h后組織內凋亡細胞已經很少，所以取材最好不要超過4h。另外，放線菌酮的劑量要控制在2～5mg/kg體重。制備成功的模型一般比較穩定。
(二)活化誘導的淋巴細胞凋亡檢測
【原理及意義】
活化誘導的淋巴細胞凋亡（AICD）是免疫調節的重要途徑之一。體外研究淋巴細胞的凋亡將有助于防治因淋巴細胞過度活化而導致的自身免疫性疾病和免疫損傷。已知IL－10、TGF－β、IFN－γ均可體外誘導Ｔ或Ｂ淋巴細胞凋亡。本試驗重點介紹研究淋巴細胞凋亡常用的檢測方法。
（1）活細胞懸液吖啶橙熒光染色法