細胞培養基礎問答

細胞培養實驗中用量最多的就是細胞培養基，雖然細胞培養試驗基本技術大同小異，但是每種細胞的培養條件卻相差甚遠。若偏離某種細胞所需的培養條件，則會導致細胞表達不同的表型

因此，在實驗前，需要熟悉自己所使用的細胞系，并在實驗中嚴格遵守所有產品的操作說明。 

在實驗過程中，作為實驗小白，我們應該如何應對相關問題呢？

來，大家看黑板啦~ 

首先，我們要如何挑選適合自己細胞生長的培養基呢？

選擇培養基沒有確切的標準，有幾點建議可供參考：

建立某種細胞株所用的培養基應該是培養這種細胞適合的培養基。可以查閱 ATCC 或在購買細胞株時咨詢供應商。

根據細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養基。如小鼠細胞株多選 RPMI1640。

其他實驗室慣用的培養基不妨一試，許多培養基可以適合多種細胞。

也可用多種培養基培養細胞，觀察其生長狀態，可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷，根據實驗室結果選擇最佳培養基，這是最客觀的方法，但比較繁瑣。

如何正確地保存培養基？

普通的培養基放置在 2-8℃ 冰箱避光保存，若已開封建議3周內使用。未開封的培養基，一般可穩定保存1年。

培養基中酚紅的作用是什么？導致培養基顏色變化的原因有哪些？

酚紅在培養基中被用來作為 pH 值的指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。

培養基顏色變黃，原因有：培養基中細胞代謝產物為酸性，培養瓶受污染，細菌代謝產酸等導致。

培養基顏色偏暗紅色，原因有：培養基保存在 4℃ 冰箱中，培養基內的二氧化碳逐漸溢出，造成培養基越來越偏堿性，而培養基中的酸堿指示劑酚紅會隨著堿性增加而更偏暗紅。

我感覺自己的培養基污染了，這要怎么進行測試呢？

取 0.1ml 液體培養基涂布到無菌蛋白棟牛肉膏培養基上 37℃ 培養 24h，觀察有無雜菌生長（肉眼即可觀察到）。

如果我的培養基中添加了血清和抗生素后，可長期保存嗎？

一旦培養基中添加了血清和抗生素，建議避光保存在 4℃ 冰箱且在 2 周內用完。因為一些抗生素和血清的基本成分在解凍后就開始降解了。

哇！我的培養基怎么有沉淀了，這是怎么回事？怎么預防處理沉淀？

先判斷培養基是否已經污染，其次，若沉淀為絮狀沉淀則可能是加入血清引起的，此沉淀對細胞培養無影響。若沉淀為結晶，有可能是因為向培養基里加入的輔助試劑降低了培養基的溶解度，使一些無機鹽析出。

可應用離心、過濾的方法去除這些沉淀，盡可能地減少血清凍融次數。

那我什么情況下可以使用不加酚紅的培養基呢？

研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素（特別是雌激素）的作用。為避免固醇類反應，培養細胞時，用不加酚紅的培養基；一些研究人員在做流式細胞檢測時，為了避免酚紅干擾檢測，也使用不加酚紅的培養基。