1. 干粉培養基原倍液的配制
1)配制過濾除菌的細胞培養基
(1) 閱讀培養基使用說明,確定需要添加何種添加劑(如NaHCO3、L-谷氨酰胺、丙酮酸鈉、HEPES等)。
(2) 根據所需將培養基全部倒入一容器中,用少量注射用水(20℃~30℃)將袋內殘留培養基洗下,并入容器。加注射用水至總體積的95%,輕微攪拌溶解。
(3) 加入規定量的碳酸氫鈉及所要添加的物質。
(4) 輕微攪拌溶解,加注射用水至規定體積。
(5) 用1 mol / L 氫氧化鈉溶液或 1 mol / L 鹽酸溶液調pH至所需值。
(6) 用0.22 μm濾膜正壓過濾除菌。
(7) 溶液應在2℃-8℃下避光保存。
具體使用方法參照培養基包裝袋上的說明書。
2)配制可高壓滅菌細胞培養基
(1) 根據所需將培養基全部倒入一容器中,用少量注射用水(20℃~30℃)將袋內殘留培養基洗下,并入容器。加注射用水至總體積的95%,輕微攪拌溶解。
(2) 在121℃、15psi下滅菌15分鐘。
(3) 待溶液冷卻至室溫,加入無菌0.2 mol / L L-谷氨酰胺溶液規定體積、無菌7.5%(w/v)碳酸氫鈉溶液規定體積,加注射用水(20℃~30℃)至規定體積,混勻。
(4) 如果必要,用1 mol / L 氫氧化鈉溶液或 1 mol / L 鹽酸溶液調pH至所需值。
(5) 溶液應在2℃-8℃下避光保存。
具體使用方法參照培養基包裝袋上的說明書。
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