1.從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化。
2. 從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養液,混勻;
3. 離心, 1000rpm,5min;
4. 棄去上清液,加入含10%小牛血清培養液重懸細胞,計數,調整細胞密度,接種培養瓶,37℃培養箱靜置培養;
5. 次日更換一次培養液,繼續培養。