對于細胞培養而言,胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)的重要性不言而喻。盡管近年來無血清培養基和非動物來源的培養基越來越受到關注,但目前大部分細胞還無法適用這些培養基,并且存在費用較高和細胞生長較緩慢的缺點,因此,含有FBS的完全培養基仍然是目前主流的細胞培養體系。
把細胞養好的三個關鍵要素是:良好的細胞來源,正確的實驗操作,以及合適的培養體系。其中“合適的培養體系”就是要創造適合細胞生長的環境,給細胞建立一個滿意的“家”,而FBS就好比于這個家的裝修,可以提高細胞的居住環境和舒適性,讓細胞更好更快地生長!
當然,FBS并不是完美的,它除了可為細胞提供生長所必須的蛋白、細胞因子、激素和微量元素等多種營養物質,同時也含有內毒素、補體、抗體等對細胞生長有危害的成分,若選擇不當,不合適的FBS會嚴重影響細胞的生長狀態甚至導致細胞死亡。因此,FBS既是讓細胞快樂成長的必備營養物,又是可能導致細胞死亡的“定時炸彈”!辛苦養起來的細胞可能因為FBS用錯而一切歸零……
那么,應如何為你的細胞選購FBS呢?選購FBS應考慮哪些標準?
血源可追溯性
選擇來源安全、可追溯的FBS對于細胞培養來說至關重要。目前市面上存在較多以假亂真的FBS產品,科研工作者對血清的真實產地、來源難以鑒別。對此,國際血清行業協會(ISIA)實施了供應鏈可追溯性的行業標準,以確保FBS的質量和安全性。例如,FBS供應商是否保留原產地的可追溯記錄?是否持有血清生產各階段處理、運輸和商業交易的文件?這些都是判斷FBS可追溯性需要考慮的因素。
產品檢測
每款FBS在生產上市之前,必須經過嚴格的質控檢測。
質控環節必不可少,以確保上市的血清符合規定合乎規格,而血清產品分析證書(COA)就是FBS質控的重要體現。在COA中,常規的檢測指標包括內毒素、總蛋白、細菌、病毒等,例如我國藥典規定,FBS中內毒素含量應≤10EU/mL,另外總蛋白為30-50mg/mL、血紅蛋白檢測不高于30mg/dL。
質量驗證
我們使用FBS目的是為了讓細胞更真實、健康地生長。在確保了FBS的來源真實性、安全可靠性后,下一步就要對FBS的質量,即培養細胞的效果進行鑒定了,而這也是決定細胞能否養好的關鍵。
在細胞培養過程,質量粗糙的FBS可能會導致細胞出現生長速度緩慢、不貼壁、容易老化等現象,從而導致實驗受阻。經過質量驗證的FBS,則可以十分確定這款FBS對哪些細胞具有良好的培養效果,進而判斷其能否把自己的細胞養好。對于質量優質的FBS,通常采用血清敏感性細胞(如干細胞)來進行培養驗證,若培養效果良好,則其他常規細胞系的培養就更不在話下。
穩定性
FBS作為其他行業的副產品,其生產在本質上會受到天氣、食物供應、經濟條件和牛群規模及疫情等各種因素的影響,導致血清的供應可能出現貨源、價格及批次間的不穩定性,從而造成實驗的不順甚至實驗失敗。在過去,國內外已有多個實驗室出現過因血清批間差異大而導致實驗結果無法重復的情況,浪費了巨大的時間和金錢成本。
因此,找到穩定提供同批次FBS的供應商,對于確保自己細胞實驗結果的真實性和可重復性具有重要意義,而且花在重復實驗或檢驗新批次上的時間將大大減少。
血清的顏色主要取決于其中的血紅蛋白濃度。血紅蛋白是一種含鐵的蛋白質,其顏色與鐵元素的狀態以及與氧氣的結合情況有關。血清中血紅蛋白濃度的不同會導致顏色的差異,但這種差異并不會影響血清的性能。因此,在使用......
建議將血清儲存于-20°C,這一溫度條件下,血清在凍存狀態時最為穩定。不推薦將血清存放在無霜冰箱中,因為無霜冰箱的溫度循環可能會導致瓶體破裂,進而使產品受到污染或發生變質。......
血清采集完成后,通過冷凍的方式運輸到加工工廠。到達工廠后,先進行解凍,隨后對血清進行一系列檢測,包括細菌、病毒、內毒素以及血紅蛋白含量等多項指標的檢測。在檢測過程中,會篩選出最優質的血清,并將其置于無......
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