二、結果
兩只兔所有標本均獲成功。倒置顯微鏡觀察平滑肌細胞24 小時均可見膀胱平滑肌細胞貼壁生長，正常兔 7 天左右、而梗阻兔則需10~12 天可于50 毫升培養瓶約 80%匯合。均傳代順利，傳代后約正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培養瓶約 80%匯合。本組中均傳至第8 代，經第8 次傳代后， 平滑肌細胞仍生長迅速，未見衰老跡象。倒置顯微鏡下觀察均呈“谷和峰”樣結構(圖1 中對照組2 周的 細胞；圖2 中實驗組培養2 周的細胞)。細胞爬片HE染色見膀胱平滑肌細胞細胞核呈兩端鈍圓的卵圓形平滑肌細胞核型(見圖 3)。電鏡檢查可見平滑肌細胞密班結構(圖 4)。免疫組化染色檢測α-SMA 呈陽性反應(圖 5)。從細胞爬片HE染色和免疫組化染色檢測α-SMA 呈陽性反應中我們發現該方法所的膀胱平滑肌細胞的純度幾乎99%。
圖1. 對照組2周的細胞
圖2. 實驗組培養2周的細胞
圖 3. 細胞爬HE染色見膀胱平滑肌細胞 ，細胞核呈兩端鈍圓的卵圓形平滑肌細胞核型
圖4. 分離后培養細胞的電鏡檢查發現，平滑肌細胞致密斑結構
圖5. α-SMA免疫組化證實該方法能獲得單一膀胱平滑肌細胞(棕色為α-SMA陽性)
