| 實驗方法原理 | 輸入高能超聲波可以破碎細胞,其機理可能與強聲波作用溶液時,氣泡產生、長大和破碎的空化現象有關。空化現象引起的沖擊波和剪切力使細胞裂解。超聲破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時間、細胞濃度及細胞類型等。 |
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| 實驗材料 | |
| 試劑、試劑盒 | |
| 儀器、耗材 | |
| 實驗步驟 | 1. 清洗后的組織用攪切機切碎成小塊,混懸在至少兩倍體積的緩沖液內;洗去培養液的細胞(細菌混懸在至少兩倍體積的緩沖液內; 2. 將超聲探頭沒入混懸液內,進行超聲破碎。一般總超聲時間約分為幾個周期,如 4 × 30 s, 周期之間讓樣品在冰浴中冷卻。 |
| 注意事項 | 1. 超聲破碎常用于多種細菌和腦組織勻漿。根據具體情況可以適當延長破碎時間,一般不宜超過 10 min,但最多處理 1 g 細菌或組織。 2. 用相差顯微鏡檢査細胞破碎的效率。 3. 超聲破碎需提醒注意的一點是在整個過程中探頭要保持低于混懸液表面。 |