實驗方法原理 根據細菌細胞在高滲溶液中或用乙醚蒸氣處理后，會產生質壁分離這一現象，經染色后也可在普通光學顯微鏡下區分細胞壁和細胞質膜。
實驗材料 巨大芽孢桿菌枯草芽孢桿菌
試劑、試劑盒 結晶紫水溶液單寧酸（鞣酸）水溶液磷鉬酸水溶液甲基綠水溶液NaCl結晶紫水溶液Bouin氏固定液硫堇水溶液乙醚
儀器、耗材 乙醚蒸氣瓶
實驗步驟
1. 單寧酸法
（1）將培養16~18小時的巨大芽孢桿菌按常法制成涂片。
（2）用5%單寧酸染5分鐘后，水洗。
（3）用0.2%結晶紫染3~5分鐘，水洗，吹干。用油鏡觀察，細胞壁呈紫色，細胞質呈淡紫色。
2. 磷鉬酸法
（1）制備濃厚的涂片，在未干時浸入1%磷鉬酸水溶液3~5分鐘。
（2）用1%甲基綠水溶液染3~5分鐘。
（3）水洗后，吹干，用油鏡觀察。細胞壁為綠色，細胞質無色。
3. 區分細胞壁與細胞質膜
（1）乙醚蒸氣法
①將巨大芽孢桿菌涂布于蓋玻片上，翻轉蓋玻片使其放在乙醚蒸氣瓶的瓶口上蒸3分鐘。
②取下蓋玻片置Bouin氏固定液中30分鐘后取出，水洗。
③用硫堇染色30秒鐘。
④水洗，水封，置油鏡下觀察。
（2）NaCl法
①取一滴25%NaCl溶液于潔凈的載玻片上。
②挑一小環培養6小時的枯草芽孢桿菌，在25%NaCl水滴中涂布均勻，待自然干燥。
③滴加0.01%結晶紫于其上，使蓋滿有菌部分，30秒鐘后水洗，干燥，用油鏡觀察結果。