實驗方法原理 應用具有鏈霉素R 因子的大腸桿菌作為供體菌,對鏈霉素敏感的痢疾桿菌作為受體菌。經共同孵育后,由于供體菌與受體菌間的接合,供體菌的鏈霉素R 因子轉移給受體菌,而使痢疾桿菌獲得耐鏈霉素的特性,因此能在含鏈霉素的S-S平板上生長。由于痢疾桿菌不分解乳糖而呈無色半透明菌落。大腸桿菌能分解乳糖產酸,在S-S 平板上使指示劑(中性紅)顯色,故為粉紅色不透明的菌落。
實驗步驟
1. 將耐鏈霉素的大腸桿菌與鏈霉素敏感的大腸桿菌和弗氏痢疾桿菌分別接種于肉湯培養基中,37 ℃培養10~12 小時。
2. 將耐鏈霉素的大腸桿菌與鏈霉素敏感的弗氏痢疾桿菌肉湯培養物按 l:4混合于一支無菌試管內,置37 ℃1小時。
3. 用接種環沾取上述混合液劃線接種于含100 ug/ml 鏈霉素的S-S (或中國蘭)平板上(S-S及中國蘭平板的制備法見實驗九腸道桿菌)置37 ℃溫箱培養18~24 小時。
4. 另取對鏈霉素敏感的大腸桿菌和弗氏痢疾桿菌按上法混合。37 ℃1 小時,接種S-S平板及含鏈霉素的S-S平板上,37 ℃培養18~24 小時。
5. 觀察上述細菌在S-S (或中國蘭)平板及含鏈霉素的S-S 平板上的生長情況。
注意事項
什么叫耐藥性變異?了解耐藥性變異有何實際意義?