細菌芽孢染色實驗_改良的SchaefferFulton氏染色法

用著色力強的染色劑孔雀緣或石炭酸復紅，在加熱條件下染色，使染料不僅進入菌體也可進入芽孢內卡進入菌體的染料經水洗后被脫色，而芽孢一經著色難以被水洗脫當用對比度大的復染劑染色后，芽孢仍保留初染劑的顏色，而菌體和芽孢囊被染成復染劑的顏色，使芽孢和菌體更易于區分。

蠟樣芽孢桿菌（約2d 營養瓊脂斜面培養物）球形芽孢桿菌（1～2 d 營養瓊脂斜面培養物）

5% 孔雀綠水溶液0.5% 番紅水溶液

小試管滴管燒杯試管架載玻片木夾子顯微鏡

1. 制備菌懸液

加 1～2 滴水于小試管中，用接種環挑取 2～3 環菌苔于試管中。攪拌均勻，制成濃的菌懸液。

2. 染色

加孔雀綠染液 2～3 滴于小試管中，井使其與菌液混合均勻，然后將試管置于沸水浴的燒杯中，加熱染色 15～20 min。

3. 涂片固定

用接種環挑取試管底部菌液數環于潔凈載玻片上，涂成薄膜，然后將涂片通過火焰 3 次溫熱固定。

4. 脫色

水洗，直至流出的水無綠色為止。

5. 復染

用番紅染液染色 2～3 min, 傾去染液并用濾紙吸干殘液。

6. 鏡檢

干燥后用油鏡觀察。

芽孢呈綠色芽孢囊及營養體為紅色。

所用菌種應掌握菌齡，以大部分細菌已形成芽孢囊為宜，取菌不宜太少。