實驗概要
本實驗介紹了細菌轉化的兩種方法：電擊法和熱擊法。
主要試劑
LB培養基
主要設備
電擊杯，電擊儀，1.5 mL的離心管，搖床，恒溫水浴鍋
實驗材料
DNA樣品或者連接產物，細菌感受態細胞
實驗步驟
1. 電擊轉化
1) 加DNA樣品或者連接產物于融化的細菌感受態細胞中，混勻后加入冰預冷的電擊杯中。
2) 將電擊杯放入電擊儀中，以2.2KV電壓電擊。
3) 立即加入適量的液體培養基，混勻后并轉移至1.5 mL的離心管中，37℃ 培養1小時(大腸桿菌)或者28℃ 培養2-3小時(農桿菌和假單胞桿菌)。
4) 取適量菌液涂在相應的選擇平板上，37℃ 培養過夜(大腸桿菌)或28℃ 培養2天(農桿菌和假單胞桿菌)。
5) 篩選陽性轉化子。
2. 熱激轉化
1) 在冰上融化后的感受態細胞中加入連接產物，混勻后冰浴30分鐘。
2) 42℃ 恒溫水浴熱激90秒，然后置冰上3-5分鐘。
3) 加入適量的LB培養基，混勻后37℃ 振蕩培養60分鐘。
4) 取適量菌液涂在相應的選擇平板上，37℃ 培養過夜。
5) 篩選陽性轉化子。