碳源氮源利用試驗是細菌對單一來源的碳源和氮源利用的鑒定試驗。在無碳或無氮的基礎培養基中分別添加特定的不同碳化物或氮化物,觀察細菌的生長狀況,就可以判斷細菌能否利用此種碳源和氮源,根據微生物對碳源和氮源物質利用的能力和代謝產物的差異,對微生物的種類進行區分。
常用的碳源氮源利用試驗有枸櫞酸鹽利用試驗、丙二酸鹽利用試驗、乙酸鈉利用試驗、馬尿酸鈉水解試驗等。