結合磁珠實驗

磁珠

Dynabead M-280鏈霉抗生物素

磁設備

實驗方案 A

1. 振蕩 lmin 以使 Dynabead M-280 鏈霉抗生物素重新成為混懸液。

2. 將 2X 的 100 ul Dynabeads 轉移至 U—個 1.5 ml 的 Eppendorf 試管中。

3. 用磁設備固定磁珠，移去上清液。

4. 用 200 ul 的 IX 結合及沖洗緩沖液重懸磁珠沖洗 3 次，固定磁珠，移去沖洗液。

5. 將 NlaIII 酶消化后的 cDNA 分成兩份各 10ul，每份中加入 90ul 的重蒸水和 100ul 的 2X 結合及沖洗緩沖液；混合后加入一份沖洗過的磁珠。

6. 混合后，在室溫下 W 育 30 min(每 IOmin 混合 1 次)。

7. 用磁設備固定磁珠，棄去上清液。

8. 用 200ul 的 IX 結合及沖洗緩沖液沖洗固定的磁珠 3 次，然后再用 200ul 的 LoTE 沖洗 1 次。

9. 在沖洗完最后 1 次后，固定磁珠并移去 LoTE。

10. 繼續進行第 5 步