維生素C含量的測定實驗

一、試劑

1. 實驗材料：水果或蔬菜。

2. 儀器：（1）微量滴定管；500毫升×1；（2）量瓶：50毫升×2；（3）三角瓶；500毫升×2；（4）研缽；（5）量筒； （6）刻度吸管；10毫升×2；

3. 試劑：

（1）1%草酸：秤取5.0克草酸溶于少量蒸餾水中，定容至500毫升。

（2）2%草酸：秤取10.0克草酸溶于少量蒸餾水中，定容至500毫升。

（3）0.001N 2，6-二氯酚靛酚鈉溶液：稱取干燥的2，6-二氯酚靛酚鈉60毫克，放入200毫升量瓶中，加熱蒸餾水中100-150毫升，滴加0.01N NaOH4-5滴，強烈搖動10分鐘冷卻后加水至刻度。搖勻后用緊密濾紙濾于棕色瓶中，貯于冰箱中備用，有效期一周。使用前需標定（見附注）。

實驗過程

1. 樣品的處理和提取：

稱取4.0克新鮮樣品，至研缽中，加5毫升2%草酸，研成勻漿。通過漏斗將樣品提取液轉移到50毫升量瓶中。殘渣再用2%草酸提取2-3次，提取液及殘渣一并轉入量瓶。2%草酸總量為35毫升，最后以水定容。溶液定容時若泡沫較多，可加幾滴乙醇消除泡沫后再定容。搖勻，過濾，濾液備用。

2. 樣品的測定：

吸取濾液10毫升，放入50毫升三角瓶中，立即用2,6-二氯酚靛酚鈉溶液滴定至出現明顯的紅色，并在15秒內不消失為止。記錄所用滴定液體積。

3. 空白測定：

在另一50毫升三角瓶內，放入35毫升2%草酸，并用1%草酸定溶，搖勻，取此液10毫升放入另一50毫升三角瓶內，用2,6-二氯酚靛酚鈉滴定至終點，記錄染料用量。



X：100克樣品所含維生素C毫克數（毫克/100克）

W：稱取樣品重（克）

V1：滴定樣品所用染料毫升數

V2：滴定空白所用染料毫升數

V：樣品提取液稀釋之總體積（即50毫升）

K：1毫升染料液所能氧化維生素C之毫克數，可由標定算出

mso-bidi-language:AR-SA">二氯酚靛酚鈉溶液的標定：準確稱取維生素C20毫克，用1%草酸溶解定容至200毫升。吸取此液10毫升，以1%草酸再次稀釋定容至200毫升。吸取此液10毫升，放入50毫升三角瓶中（同時吸取10毫升1%草酸于另一個50毫升三角瓶中，做空白對照立即用所要標定的2，6-二氯酚靛酚鈉滴定至粉紅色出現15秒不消失，記錄所用毫升數，按下式計算K值（即1毫升染料所能氧化抗壞血酸的毫克數）。

(式中：G為稱取維生素C的毫克數。V為滴定10毫升標準維生素C時所用去染料的毫升數，與滴定空白所用毫升數之差值)

2. 操作要盡可能快，并防止與鐵銅器具接觸，以減少維生素C的氧化。

3. 草酸及樣品的提取液避免日光直射。

4. 當樣液本身帶色時，測定前于提取液中加2-3毫升二氯乙烷。在滴定過程中當二氯乙烷由無色變粉紅色時，即達終點。