維生素D無生理活性，需先在肝內轉變為25-羥維生素D2，再在腎內轉變成1，25-二羥維生素D，才具有活性。
其主要作用是參與鈣、磷代謝：
①促進鈣、磷在小腸和腎小管的吸收，維持正常穩定的血鈣和血磷濃度。
②在甲狀旁腺素和降鈣素的協同下，促進骨鈣入血，維持血鈣和血磷的平衡。
③促使鈣沉著于新骨形成部位，促進生長和骨骼鈣化，促進牙齒健全。缺乏時，鈣、磷吸收減少，表現為低鈣血癥，低磷血癥，可出現手足抽搐和驚厥等；使成骨過程受阻，甚至骨鹽再溶解，兒童引起佝僂病，成年人引起骨軟化癥。
