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  • 發布時間:2019-03-31 20:46 原文鏈接: 編碼DNA結合蛋白的cDNA克隆的檢測、純化和鑒定實驗

    用鹽酸胍進行干燥膜的變性/復性循環

    試劑、試劑盒

    HEPES結合緩沖液

    實驗步驟

    1) 按基本方案步驟1?15進行。


    2) 將平皿在4℃冷卻10 min。用針扎孔標記各膜的位置。小心地揭起膜,室溫下在空氣中瞭干15 min。


    3) 將膜浸于HEPES結合緩沖液/6 mol/L鹽酸狐中,4℃輕輕搖動溫育10 min。在新 鮮的HEPES結合緩沖液/6 mol/L鹽酸胍中重復1次。


    4) 將膜浸于HEPES結合緩沖液/3 mol/L鹽酸胍(每10張膜50 mL)中,4℃ 5 min。 重復4次。每次用HEPES緩沖液及濃度較前次減半的鹽酸胍進行漂洗。


    5) 將膜浸于HEPES緩沖液(50 mL/10張膜)中,4℃ 5 min。用新鮮緩沖液重復洗1次。


    6) 在BLOTTO中溫育封閉。


    7) 進行濾膜篩選。

    展開


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