照高效液相色譜法測定。
色譜條件與系統適用性試驗：
用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇－水（10：90）為流動相；檢測波長為248nm。取肌苷對照品約10mg，加1mol/L鹽酸1ml，80℃水浴加熱10分鐘，放冷，加1mol/L氫氧化鈉1ml，加水至50ml，取20ul注入液相色譜儀，肌苷峰與相鄰雜質峰的分離度應符合要求，理論板數按肌苷峰計算不小于2000。
測定法：
取本品適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含20μg的溶液，搖勻，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱取肌苷對照品適量，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。