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  • 發布時間:2022-12-22 10:27 原文鏈接: 肝素的檢測肝素

    APTT
    APTT依然是作為監測UFH的選擇之一。它是非常簡單,快速和便宜的項目。然而,卻難以標準化。APTT檢測需要整個凝血瀑布中的所有蛋白都是完整的,從而可以準確測量肝素水平。有狼瘡抗凝物或抗磷脂綜合癥的病人通常都有APTT升高,他們就必須使用肝素試驗來監測。除了不同凝血因子水平的因素,試劑和儀器會影響其對肝素的敏感性,導致在實驗室之間結果最終會有多達四倍的差異。國際血栓與止血協會和標準化委員會(ISTH SSC)企圖建立一個標準方法,類似PT實驗中使用的ISI一樣,給APTT試驗建立一個糾正系數。但是由于磷脂,激活劑和儀器種類的多樣化,這一工作只取得了一點進步。ISTH建議每個APTT的檢測系統都應當采用推薦的方法,通過肝素抗Xa活性來進行定標并獲得相應的APTT監測范圍。
    硫酸魚精蛋白中和試驗
    該試驗是基于UFH,一個高度負電荷的分子,被硫酸魚精蛋白,一個正電荷的蛋白,中和的原理。配備不同濃度的硫酸魚精蛋白加入血漿中,再加入凝血酶,測量凝固時間。將凝血酶凝固時間恢復至正常的硫酸魚精蛋白濃度就被認為是肝素的濃度,這個過程僅僅用于UFH。
    抗Xa活性檢測
    發色底物法檢測肝素抗Xa活性的原理都是一樣的:標本中的肝素與AT形成復合物,抑制過量添加的Xa因子。剩余的Xa因子活性的測量,通過其與特異的底物作用,釋放出pNA來進行。這一反應與肝素濃度成反比。不同的只是反應孵育時間,稀釋用的緩沖液,底物以及是否添加外源的AT。緩沖液中的硫酸葡聚糖可以降低PF4的影響。
    一步法檢測
    一步法測量肝素使得檢測更加簡單,并縮短了時間。這種方法不添加外源性AT。
    檢測是基于競爭抑制原理。加入Xa到血漿中與底物混合,立即同時有2個反應:底物被Xa水解和Xa被肝素-AT復合物抑制。一旦反應達到平衡,底物中釋放出的pNA與待測血漿中肝素濃度成反比。在這個檢測中,沒有添加外源性的AT,完全依賴病人血漿中的AT數量。這就代表了病人真實的肝素功能反應。病人AT水平在35%-130%之間,肝素濃度檢測不會受到影響。


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