腸道桿菌的鑒定

腸道桿菌是一群寄居于人或動物的腸道內的細菌，多數為非致病菌或條件致病菌，少數為致病菌。其生物學性狀相似，但生化反應、抗原  構造有差異，據此可將它們分類、鑒定。
實驗目的：
1.熟悉腸道桿菌未知標本分離和鑒定方法；
2.掌握肥達式反應的原理及結果分析，熟悉其操作過程；
3.了解大腸桿菌  、痢疾桿菌及傷寒桿菌革蘭氏染色形態示教片
4.了解腸道桿菌常見的一些生化反應及其在鑒定上意義、
實驗材料：
1. 大腸桿菌或痢疾桿菌或傷寒桿菌革蘭氏染色形態示教片
2.大腸桿菌、痢疾桿菌（或傷寒桿菌）在SS培養基上的培養物（示教）；
3.大腸桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌、副傷寒甲或乙等在雙糖鐵培養基上的 培養物（示教）；
4.大腸桿菌與痢疾桿菌（或傷寒桿菌）的混合菌液（模擬糞便標本）；
5.痢疾桿菌及傷寒桿菌診斷血清，生理鹽水，玻片；
6.診斷用肥達式菌液、肥達式平板、小試管、吸管、無菌滴管、傷寒患者血清（經56℃30分鐘滅活）、水浴箱等；
7. 單糖發酵管、蛋白胨水培養基、醋酸鉛培養基、葡萄球菌和綠膿桿菌在普通瓊脂  平板上的培養物。
實驗內容：
1．肥達氏反應
①原理：人體感染傷寒桿菌或副傷寒桿菌后，能產生與這些細菌起特異性反應的抗體，這種抗體及其量可以用已知的抗原來測得。本實驗用已知的傷寒桿菌H、0抗原和甲型、乙型副傷寒桿菌的H抗原與可疑病人血清做定量凝集試驗，可測定患者血清中相應抗體的含量及其增減情況，以協助傷寒或副傷寒病的診斷。
②方法：
ⅰ）取一有20（5*4）孔的有機反應板2塊，連續標號，每行分別標號1~10。
ⅱ）取中試管1支，加入3.9ml生理鹽水，再換一支吸管，吸取患者血清0.1ml（經56℃30分鐘滅活）放入中試管內，吸打混勻；（此時血清稀釋度為1：40）。
ⅲ）吸取1：40的血清2ml，在每列的第一孔中各加入0.5ml。
ⅳ）在中試管余下2ml血清中，再加入2ml生理鹽水，混勻（血清稀釋度為1：80）。然后吸取此1：80的血清2ml，在每列第2管中各加入0.5ml。
ⅴ）按上述倍比稀釋，并依次加入各管，直至每行第9管（見表7-1）。                       
ⅵ）另取吸管1支，吸取生理鹽水向每行第10管中各加入0.5ml（對照管）